porównanie metod SEC i CE-SDS do monitorowania fragmentacji zawiasów w przeciwciałach monoklonalnych IgG1

fragmentacja przeciwciał monoklonalnych jest krytycznym atrybutem jakości rutynowo monitorowanym w celu oceny czystości i integralności produktu od opracowania do komercjalizacji. Rozszczepienie w górnym obszarze zawiasu przeciwciał monoklonalnych IgG1 jest częstym wzorem fragmentacji szeroko badanym przez chromatografię wykluczającą rozmiar (sec). Elektroforeza kapilarna z dodecylosiarczanem sodu (CE-SDS) jest dobrze ugruntowaną techniką powszechnie stosowaną do monitorowania fragmentów przeciwciał, ale jej porównywalność do SEC w monitorowaniu fragmentów zawiasów nie została do tej pory ustalona. Raportujemy strategię charakteryzacji, która ustanawia korelację między fragmentami regionu zawiasów analizowanymi przez SEC i CE-SDS. Przeciwciała monoklonalne z podwyższonymi fragmentami zawiasów generowano w warunkach niskiego stresu pH i analizowano za pomocą SEC i CE-SDS. Masy wytworzonych fragmentów oznaczono metodą LC-MS. Migrację elektroforetyczną produktów fragmentacji zawiasów w CE-SDS określono na podstawie wartości ich masy. Porównawcza ocena fragmentów metodą SEC i CE-SDS wykazała podobną korelację z czasem inkubacji. Badanie to pokazuje, że CE-SDS może być stosowany jako technika zastępcza do SEC do monitorowania fragmentów regionu zawiasów. Co najważniejsze, połączenie tych technik może być wykorzystane do uzyskania kompleksowego zrozumienia cech terapeutycznych produktów białkowych związanych z fragmentami.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.