metody ekstrakcji chlorofilu do kwantyfikacji zielonych mikroalg kolonizujących fasady budynków

występowanie mikroalg na powierzchniach wytworzonych przez człowieka, takich jak dachówki, Beton, fasady budynków i inne sztuczne powierzchnie w obszarach miejskich, gdzie powoduje estetyczne niedopuszczalne przebarwienia powierzchni, stanowi widoczny problem ze względu na jego wkład w biodeteriorację i Przyspieszone wietrzenie. Do tej pory kolonizacja mikrobiologiczna była rejestrowana głównie makroskopowo, a więc częściowo ilościowo oceniana na podstawie stopnia odbarwienia i danych wizualnych przypisanych do skali barwnej dla intensywności inwazji glonów. Jednak oceny te nie mają interkalibracji i cierpią z powodu modyfikacji koloru ze względu na współwystępujące grzyby lub właściwości tła. Dzięki zastosowaniu chlorofilu a jako specyficznego biomarkera mikroalg aeroterrestrialnych opracowano metodę ekstrakcji w celu ilościowego określenia biomasy. Dwie zielone mikroalgi, Stichococcus Sp. oraz Chlorella Sp., zostały wyizolowane z fasad budynków, ustanowione jako monokultury i wykorzystywane w niniejszym opracowaniu. Próbki glonów najlepiej konserwuje się przez zamrażanie w ciekłym azocie, a następnie liofilizację, a następnie Przechowywanie w temperaturze -18 °C. najlepszym rozpuszczalnikiem ekstrakcyjnym okazał się dimetyloformamid (DMF). Homogenizacja mechaniczna poprawiła ekstrakcję nawet o 20%. Jednak skuteczność ekstrakcji chlorofilu A była silnie specyficzna dla gatunku i miała dalszy wpływ na warunki wzrostu, tj. czy komórki znajdowały się w logarytmicznej lub stacjonarnej fazie wzrostu. Aby uzyskać maksymalne wartości chlorofilu A Z próbek o nieznanym składzie gatunków glonów i stanie fizjologicznym, stwierdzono konieczność wykonania co najmniej dwóch 24-godzinnych ekstrakcji w DMF. Jeżeli drugi etap ekstrakcji przyczynił się > 20% do całkowitego stężenia chlorofilu a, zastosowano trzecią ekstrakcję DMF. Stosując ten test biomarkera, otrzymano do 313 mg chlorofilu A m-2 z fasad budynków, co odpowiada około 100 g świeżej masy glonów, co stanowi duży ładunek organiczny.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.