defekt w białku mitochondrialnym Mpv17 leży u podstaw przezroczystego Kacpra danio pręgowanego

szczep Kacpra danio pręgowanego jest szeroko stosowany w badaniach od raka do neuronauki. casper oferuje zaletę względnej przezroczystości w dorosłym życiu, dzięki czemu jest szczególnie przydatny do obrazowania in vivo za pomocą mikroskopii epifluorescencyjnej, konfokalnej i lekkiej. casper został opracowany przez selektywną hodowlę dwóch wcześniej opisanych recesywnych mutantów pigmentowych: 1) Masa perłowa, która zawiera inaktywującą mutację genu mitfa, czyniąc rybę pozbawioną barwnikowych melanocytów; i 2) roy orbison, mutant o niezidentyfikowanej do tej pory genetycznej przyczynie, w której brakuje refleksyjnych irydoforów. Aby wyjaśnić molekularną naturę mutacji Roya Orbisona, tak aby mogła ona informować o badaniach z wykorzystaniem Caspera, podjęliśmy wysiłek, aby pozycyjnie sklonować mutację Roya Orbisona. Odkrywamy, że roy orbison jest spowodowany defektem intronowym w genie mpv17, kodującym wewnętrzne białko błony mitochondrialnej, które jest związane z zespołem zubożenia ludzkiego mitochondrialnego DNA. Mutacja Roya Orbisona jest fenotypowo i molekularnie bardzo podobna do innego mutanta irydoforu danio pręgowanego o nazwie transparent. Używając chryzpantów wywołanych Cas9 i mutantów linii zarodkowej z zaburzoną otwartą ramką odczytu mpv17, pokazujemy w embrionach trans-heterozygotowych, że nowe allele mpv17, Roya Orbisona i transparent nie uzupełniają się nawzajem. Nasza praca dostarcza genetycznych dowodów, że zarówno roy orbison, jak i transparent wpływają na locus mpv17 przez podobną, jeśli nie identyczną zmianę genetyczną. Identyfikacja mutantów mpv17 pozwoli na dalsze badania związku między funkcją mitochondriów a pigmentacją, która do tej pory nie cieszyła się dużym zainteresowaniem.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.