dette forslaget addrsses struktur-funksjon forholdet mellom vitamin k-avhengige blodkoagulasjon proteiner, med spesiell oppmerksomhet til gamma carboxyglutamic acid. Dette programmet, som involverer fire separate, men relaterte prosjekter, har utviklet seg fra tidligere arbeid utviklet i forrige periode. I Prosjekt #1 vil struktur-funksjon forholdet Mellom Faktor IX og protrombin bli studert. Mutante former av disse proteinene, oppnådd fra pasienter med arvelige strukturelle og funksjonelle abnormiteter av disse proteinene, vil bli renset ved hjelp av konformasjonsspesifikke antistoffer, fragmentert av proteolyse, og de mutante peptidene sekvensert. Den molekylære defekten i hvert mutantprotein vil bli etablert og korrelert med funksjonelle defekter. I Prosjekt # 2 vil det nyoppdagede kc4-blodplatemembranproteinet være fullt karakterisert og lokalisert til spesifikke subcellulære organeller. Funksjonen og bindingsegenskapene til dette proteinet, uttrykt bare på aktiverte blodplater, vil bli bestemt. Prosjekt # 3 vil definere Glas rolle i protrombin. En ny Modell Av Gla -, metall-og membraninteraksjon i protrombin ved bruk av immunokjemiske og spektroskopiske tilnærminger vil bli evaluert. Membranbindingsegenskapene og gla-fordelingen av en serie delvis karboksylerte protrombin bør gi innsikt i dette problemet. Prosjekt # 4 er en direkte klinisk anvendelse av våre immunokjemiske studier. Ved å bruke antistoffer som er spesifikke for det fullstendig karboksylerte protrombin (NPT) og des-gamma-karboksyprotrombin (APT), vil vi fortsette en klinisk studie for å evaluere disse analysene som en forbedret metode for overvåking av oral antikoagulant terapi. K-vitaminmangel hos nyfødte og deres mødre vil bli studert, med håp om å utvikle enkle rasjonelle tilnærminger for å eliminere hemorragisk sykdom hos nyfødte. Videre vil analyse AV kc4-antigenet, spesifikt for aktiverte blodplater, bli utforsket som en metode for påvisning av pretrombotisk tilstand. Disse grunnleggende og kliniske prosjektene skal bidra til forståelsen av denne gruppen proteiner, gi nye modaliteter for diagnostisering av pretrombotisk tilstand og vitamin K-mangel, og utvikle ytterligere data for å rettferdiggjøre bruken av NPT-analysen over protrombintiden, redusere morbiditeten/dødeligheten forbundet med oral antikoagulasjonsbehandling.