Her-2/neu status kan detekteres ved å analysere antall genkopier Ved Southern blotting, PCR eller FISH, eller mengden uttrykt protein kan fastslås av western blotting, enzymbundet immunosorbentanalyse eller ihc. DE to mest brukte metodene for tiden ER IHC og FISH fordi De er i stand Til å evaluere Her-2 / neu i formalin-fast parafin-innebygd arkivvev.
DE Fleste Her-2/neu-studier har blitt utført AV IHC, som oppdager overuttrykk Av Her-2/neu-proteinproduktet på cellemembranen i tumorceller. DENNE studien brukte CB11 monoklonalt antistoff, som, som det standardiserte polyklonale HercepTest, er rettet mot det intracytoplasmatiske domenet Til her2 / neu-molekylet .
IHC er lett tilgjengelig og lett å utføre til en rimelig pris. Imidlertid er denne semi-kvantitative prosedyren besatt av tekniske artefakter, sensitivitetsforskjeller mellom forskjellige antistoffer og subjektiv tolkning, noe som resulterer i interobserver variabilitet mellom patologer . Studier viser overfølsomheten TIL Us Food And Drug Administration-godkjent HercepTest, med en falsk positiv hastighet så høy som 50% . Thomson og kollegaer konkluderte med at i tilfeller MED IHC-flekkintensitet på 1+ eller 2+, er interobserver-avtalen dårlig og den prediktive verdien er utilfredsstillende for klinisk bruk; de anbefalte ytterligere testing, helst MED FISK .
FISK er en ganske objektiv og kvantitativ prosedyre for å oppdage Her-2/neu genforsterkning på kjernene i tumorceller. Ulempene ved denne prosedyren er dens bratte kostnad (10 ganger DEN FOR IHC), raffinement, behovet for et fluorescensmikroskop, det midlertidige signalet (det krever et spesielt kamera) og dets manglende evne til å oppdage og vurdere tumorhistomorfologi.
her-2/neu-overuttrykk oppdaget AV IHC er sterkt korrelert med genforsterkning oppdaget AV FISK (så høy som 98% konkordans). Imidlertid viser 3-15% av brystkarsinomer moderat Her-2 / neu membranfarging uten tegn på forsterkning. De representerer oftest svært sensitiv uspesifikk farging (falsk positiv) og sjelden enten forbedret mRNA-transkripsjon i fravær av amplifikasjon eller genforsterkning som er under deteksjonsnivået for in situ hybridiseringsmetoder .
Kakar og kollegaer konkluderte med AT IHC er egnet for den første Her-2 / neu-vurderingen, men pasienter med svulster som scoret mindre enn 3+ (spesielt de tolket som 2+) ville ha nytte AV FISH for å vurdere Her-2/neu-status mer nøyaktig og for å unngå unøyaktig prognostisering og upassende behandling .
CISH er en nylig fremgang I her-2/neu deteksjon. Den bruker en robust unik sekvensprobe utviklet for in situ hybridisering og er et lovende praktisk alternativ TIL FISK. Etter Den første Cish studie Av Tanner Og kolleger , syv andre rapporter positivt validert CISH resultater . Konkordansen MELLOM CISH OG FISK varierte fra 85% til så høyt som 100% . Alle disse rapportene bemerket fordelene MED CISH OVER FISK: det krever et vanlig mikroskop; metoden er mindre tungvint og mer økonomisk; signalintensiteten er permanent; og patologer er kjent med IHC-signaler og er i stand til å korrelere funn med den underliggende tumorhistomorfologien. CISH tillater observatører å velge felt av invasiv duktal karsinom, unngå foci av intraductal karsinom Som Her-2 / neu har en annen klinisk betydning. CISH er en spesifikk, sensitiv og lett anvendelig metode for påvisning Av Her-2 / neu genforsterkning, og den kan brukes sammen MED IHC for evaluering av pasienter med brystkarsinom . Ross og kolleger har nylig gjennomgått nåværende status For Her-2 / neu-testing ,og de konkluderte med AT CISH er en mer praktisk genbasert teknikk som venter i vingene.
i denne foreliggende studien var konkordansen mellom 3+ IHC og CISH-forsterkede tilfeller 100% (40 av 40), noe som betegner at alle genforsterkede tilfeller overeksprimerer her-2/neu-proteinet. I kontrast var avtalen om 2 + IHC og CISH-forsterkede tilfeller bare 45%, noe som er lavere enn tidligere rapportert (93%) . 13.75% (22 av 160) IHC-positive/CISH ikke-forsterkede svulster i denne studien, som alle hadde 2 + IHC-score, er høyere enn 6% falskt positivt resultat Av Zhao og kolleger , selv om det er sammenlignbart med 17% resultatet (IHC CB11 versus FISK) oppnådd Av Tubbs og kolleger . Tilsynelatende finner vi at 2 + IHC-poengsummen er tvetydig sammenlignet MED CISH. Denne delmengden kan ha nytte av ytterligere cish refleks testing. Alle negative IHC tilfeller VAR CISH ikke-forsterket, viser fullstendig enighet om alle negative resultater. 86,25% samlet samsvar MELLOM IHC (VED BRUK AV CB11 antistoff) og CISH i denne studien er lavere enn tidligere rapporter (94-96%) . Vi er enige Med Sapino og kollegaer om at genforsterkningsanalyse kan unngås i alle 0, 1+ og 3+ IHC tilfeller fordi resultatene er forutsigbare FRA IHC og er helt overensstemmende med CISH . Nytten AV CISH er derfor i ytterligere testing Av Her-2 / neu endring på tvetydige tilfeller I IHC, som fortsatt er den primære screeningsmetoden. DEN kombinerte ihc-CISH-algoritmen gir en økonomisk og omfattende Her-2 / neu-data for å veilede klinikere i kartlegging av behandlingsalternativer.
den LAVFORSTERKEDE cish-kategorien (6-10 signaler) var den vanskeligste å tolke, og krevde en nøyaktig opplisting av genkopi. Signal clustering, mer sannsynlig et resultat av intrachromosomal forsterkning av homogent flekker regioner, ble umiddelbart tydelig i sterkt forsterkede tilfeller og ble lett evaluert .
en test for kromosom 17 aneuploidy ble ikke utført på IKKE-forsterket OG lavforsterket cish-analyser, fordi nyere studier viste at det gjør analysen dyrere og tidkrevende uten å legge til relevante data, bortsett fra å rapportere det anbefalte antallet nukleare amplikoner og fungere som en annen form for intern kontroll for hybridiseringsreaksjonen . I tillegg, selv om produsenten (Zymed) foreslo at kromosom 17 aneuploidy testes på alle genforsterkede tilfeller, er Vi enige Med Vera-Roman og kolleger, som korrekt påpekte at fordi de fleste polysomy-resultater faller innenfor det grå området på tre til fem signaler, og setter terskelen for cutoff-signalpunkter til en høy på seks eller flere (som i denne studien) nesten eliminerer polysomy-variabelen.
denne studien observerte IKKE ihc-negative cish-forsterkede svulster. Dette kan trolig forklares med det faktum at dette var en enkelt institusjon studie sannsynlig å ha jevnt fast og behandlet tumorvev parafin blokker samt en jevn antigen henting teknikk, som begge gjør HØY KVALITET IHC enklere. Zhao og kolleger rapporterte sporadiske IHC-negative CISH-forsterkede tilfeller, og de anså at disse representerer en liten ubestemt prosentandel Som forsterket Her-2/neu uten overuttrykk . Den samme studien og ANDRE FISKESTUDIER noterte også sjeldne 3 + IHC-svulster som ikke ble forsterket (falsk positiv) . Årsakene som tilbys FOR IHC-CISH avvik er lik de mellom IHC OG FISH, som tidligere nevnt i denne rapporten.
årsakene til testfeil og falsk negativitet som tilbys av tidligere cish-studier var fravær av svulst på seksjonen, manglende evne til å score på grunn av høy bakgrunn, lav signalintensitet til tross for gjentatte forsøk, fravær av signaler fra internkontrollen og bruk av alkohol-formalin-eddiksyrefiksativ . Det ble videre bemerket at varmeforbehandling og fordøyelse med pepsin er de mest kritiske prosedyrene for optimalisert cish-ytelse, og at vellykkede mengder CISH var lave når 20 år gamle vevsblokker ble brukt .
Sauer og kollegaer korrelerte IHC-og FISKERESULTATER med klinisk prognose. DE bemerket at IHC / FISH-positive tilfeller samt FISH-positive-only tilfeller hadde samme prognose for overlevelse, MENS IHC-positive-only tilfeller hadde en prognose som ligner PÅ IHC / FISH-negative svulster. I KONTRAST hadde IHC-negative/FISK-positive tilfeller en overlevelsessannsynlighet tilsvarende DEN FOR IHC / FISK-positive tilfeller. De samme forfatterne konkluderte med at HVIS BARE IHC ble brukt som et primært verktøy, VILLE IHC-negative/FISK-positive tilfeller bli savnet; disse kvinnene ville ikke ha nytte av trastuzumab og deres overlevelse ville bli negativt påvirket. I motsetning TIL DETTE SYNES IHC-positive-only svulster å tilhøre en bedre prognostisk gruppe, og manglende påvisning av dem vil trolig ikke ha en negativ effekt på overlevelse .
fordi kliniske utfallsstudier ennå ikke har tatt hensyn til nytten av DE LAVFORSTERKEDE OG HØYFORSTERKEDE cish-resultatene, spesielt den usikre signifikansen av den lavforsterkede gruppen, er disse kategoriene fortsatt i flux. Til tross for denne begrensningen er det fortsatt verdi i å rapportere slike forsterkede grupper separat for tiden, i påvente av hvilke kliniske foreninger som vil bli oppnådd i fremtiden. Intraobserver og interobserver variabilitet på rapportering lav-forsterket OG høy-forsterket cish resultater ble ikke inkludert i denne studien, selv om patologen som tolket CISH analysene konsekvent brukt kriteriene satt av produsentene.
Brystkreft hos premenopausale kvinner har en annen biopatologisk profil enn hos eldre pasienter, med overvekt av ugunstige prognostiske parametere, inkludert en høyere frekvens av grad 3 svulster og hyppigere Her2 / neu overuttrykk . Ung alder fungerer som et surrogatmål for ugunstige prognostiske profiler . Denne studien klarte ikke å etablere sammenhengen mellom menopausal status, som ble vilkårlig satt til 50 år og over, Og her2 / neu endring.
her2/neu-forsterkning var direkte korrelert med grad og histologisk type brystkreft . Sapino og kolleger foreslo at patologen på grunnlag av tumorgrad og histologisk type skal kunne indikere for onkologen hvilken brystkreft som krever Her2 / neu-analyser . Men mens ingen av de fire godt differensierte svulstene viste Her2/neu forsterkning eller overuttrykk, ble det ikke samlet noen signifikant korrelasjon i denne studien med Hensyn Til Her2 / neu status og histologisk karakter; vi abonnerer derfor fortsatt på å teste Her2 / neu på alle nydiagnostiserte brystkreft. Samlet sett forutså ikke aldersfordeling av brystkreftpasienter og tumorhistologisk grad IHC og Cish Her2/neu-status signifikant.