Abstract
Vi har brukt en to-trinns klonal kultur system for å utvetydig demonstrere at individuelle primitive lymfohemopoietiske stamfedre celler har kapasitet for differensiering langs enten myeloid eller b-lymfoid avstamning. Sterkt beriket murine marg celler ble belagt individuelt i kultur av mikromanipulation i nærvær av pokeweed mitogen-stimulert milt celle betinget medium, erytropoietin, stål faktor (SF), og interleukin (IL) 7. Førtifem prosent av enkeltcellene dannet primære kolonier som uttrykker flere hemopoietiske linjer. Når aliquoter fra individuelle kolonier ble replert i sekundær metylcellulosekultur som inneholdt SF og IL-7, ga 41% av de primære koloniene opphav til lymfocyttkolonier. Cellene i lymfocyttkoloniene var blastlignende Og B220+, sIg -, Mac-1 -, Gr-1 -, Ly-1 -, L3T4 -, Ly-2-og CD3 -. Tretti til 70% av cellene var Thy-1+. mu-kjede mRNA ble påvist i de fleste cellene ved in situ hybridisering med en antisense RNA-sonde. Når lymfocyttkolonier avledet fra en enkelt celle ble samlet og individuelt injisert i scid-mus, var Donor-Type IgM målbar i serum hos mus og milter inneholdt donor-Type B-celler. Vi utførte deretter første screening av vekstfaktorer for å identifisere vekstfaktorer som kan erstatte pokeweed mitogen-stimulert miltcelle betinget medium i primærkulturen. Kombinasjoner av to faktorer som inkluderte SF pluss IL-6, IL-11 eller granulocyttkolonistimulerende faktor var alle effektive i primærkulturen for å opprettholde b-lymfoidpotensialet. INTERESSANT NOK KUNNE IL-3 verken erstatte ELLER handle synergistisk med SF for å støtte lymfoidpotensialet til de primære kulturer. Våre observasjoner viser at mange primitive progenitors tidligere antatt å være myeloid-begått også har B-lymfoid potensial. Dette kultursystemet bør være verdifullt for å klargjøre mekanismene som regulerer tidlige stadier av lymfohemopoiesis.