selv om det meste av arbeidet med klamydiainfeksjoner av små drøvtyggere gjelder søyer, har klamydiose en økonomisk og folkehelsepåvirkning i mange geit gårder over hele verden. Chlamydial abort ble rapportert for Første gang I Tyskland i 1959.Etter det ble sykdommen diagnostisert I Bulgaria, Spania, USA, Frankrike, India, Japan, Storbritannia, Tsjad, Hellas Og Tunisia. På mange områder er chlamydial abort den andre årsaken til smittsomme aborter etter brucellose, og hovedårsaken i de fleste land hvor brucellose er kontrollert
Etiologi
sykdommen skyldes en liten Gram-negativ bakterie, Chlamydia psittaci, som vokser i cytoplasma av eukaryote celler i en unik utviklingssyklus der en resistent smittsom form, de elementære legemene (EB) veksler med en metabolsk aktiv ikke-smittsom form de retikulære legemene (RB). EB festes til membranen i vertscellen og fremmer sin egen endocytose i en membranbegrenset vakuol kalt inkluderingen, som ikke smelter sammen med lysosomer. DERETTER transformerer EB I RB, som replikerer ved binær fisjon. Etter flere divisjoner forvandler RBs, som fyller all inkludering, tilbake til smittsomme EBs. Disse EBs frigjøres gjennom vertscellelyse eller ekstrudering av inkluderingen ut av vertscellen .
Taksonomi
Chlamydia psittaci Er en av De fire artene av slekten Chlamydia, som også inkluderer Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae og Chlamydia pecorum.
Chlamydia trachomatis og Chlamydia pneumoniae er begge humane patogener. C. psittaci infiserer et bredt utvalg av fugler, pattedyr og noen ganger mennesker og c. pecorum forurenser drøvtyggere, svin og koalaer. Hos søyer og geiter forårsaker c. pecorum lungebetennelse, konjunktivitt og leddgikt, men er svært ofte isolert fra asymptomatiske tarminfeksjoner .
Unntatt i svært sjeldne tilfeller tilhører stammer som induserer abort i geiter C. psittaci serotype-1, som også er ansvarlig for lungebetennelse, konjunktivitt og leddgikt og noen ganger tarminfeksjoner uten kliniske tegn. C. psittaci-arten er svært heterogen og før den fjerde arten c. pecorum dukket opp .
Fylogenetiske analyser AV 16s og 23s rrna gener foreslå eksistensen av ni differensierte arter I Chlamydiaceae, og bly Everett et al., for å foreslå opprettelsen Av to nye slekter Chlamydia Og Chlamydophila. Slekten Chlamydia, som tilsvarer den gamle chlamydia trachomatis benevnelse omfatter 3 arter: C. trachomatis (humane stammer), c suis (svinestammer relatert Til c. trachomatis isolert fra spontane aborter, vaginale infeksjoner, og pneumoniae) og c. muridarum (mus-hamster stammer).
slekten Chlamydophila regrupperer 6 arter: C. pneumoniae, C. pecorum, C. psittaci (tidligere Chlamydia psittaci aviær stammer), C. caviae, agent for marsvin inklusjon konjunktivitt (GPIC), C. felis (C. psittaci stammer som smitter katter) Og C. abortus (klassisk serotype-1 Chlamydia psittaci stammer). Resultatene er i samsvar med de som er oppnådd gjennom fylogenetiske analyser av fem andre kodende gener (GroEL, KDO-transferase, MOMP, 60-kDa cystein-rik protein og cystein-rik lipoprotein) og de biologiske egenskapene til stammene . Restriksjonslengdepolymorfisanalysen (rflp) av det ribosomale intergeniske spacerdomenet AV 16s-23s rrna-gener gir en rask og reproduserbar metode for å identifisere og klassifisere klamydiastammer i den nye arten . Noen memebers av det vitenskapelige samfunn er imidlertid ikke enige med forslaget til en ny Klamydial taksonomi, da det ikke tar hensyn til hele genomet av bakteriene.
Kliniske Tegn
Chlamydiosis er klinisk preget av abort i de siste månedene av svangerskapet, dødfødsler eller for tidlig fødsel av svake barn med lav fødselsvekt. Abort oppstår uten tidligere kliniske spesifikke tegn selv om noen geiter kan utvikle vedvarende hoste uten åndenød, eller leddgikt og keratokonjunktivitt. I eksperimentelle infeksjoner ble det observert liten vaginal utslipp dagen før abort på noen geiter . Beholdt placentas og metritis er ikke vanlig, selv om de er hyppigere enn hos søyer . Etter abort kan geiter komme seg raskt eller kan presentere brun utslipp fra skjeden. I eksperimentelle infeksjoner eller i noen naturlige infeksjoner med en høy grad av aborter bare 50% eller mindre av geiter som avbrutt, utvinnes raskt mens post mislykket sykdom i søyer er uvanlig. Dette kan skyldes virulensforskjeller mellom stammer siden svært lite er kjent på virulensmekanismer av stammer. Ingen forskjell i virulens kunne påvises i musemodeller mellom sau-og kaprinstammer, men amplified fragment length polymorphism (aflp) viste genomiske forskjeller MELLOM kaprinstamme AC1 OG sau serotype – 1 c. psittaci-stammer .
selv om vi har vist at vedlikehold av infiserte geiter kan resultere i infiserte sires , har det til nå ikke blitt beskrevet epiddymitt på Grunn Av c. psittaci i sires. Dette er trolig på grunn av svært lite antall studier på caprine chlamydiosis snarere enn en større mottakelighet for værer og okser til chlamydial infeksjoner.
i en nylig infisert flokk frekvensen av abort er alvorlig. Ofte 30% eller mer, noen ganger 90% av gravide gjør kan avbryte og melkeproduksjonen kan reduseres. Den høye abortfrekvensen observeres i 2 eller 3 år, hvoretter sykdommen tar en syklisk natur: 10% av gravide kvinner vil avbryte hvert år i flere år til et nytt utbrudd oppstår, og da vil alle åringene avbryte. Det høye nivået av immunitet produsert etter abort er ansvarlig for den sykliske utviklingen av sykdommen i flokken: det er eksepsjonelt for en geit å avbryte to ganger. Papp og Shewen har vist at noen av søyene som aborteres kan bli kronisk smittet. Klamydialantigener og DNA kan detekteres i skjeden, livmor og livmorrør i løpet av den peri-ovulatoriske perioden av søyer som avbrutt. Ingen forskning har blitt gjort for å bestemme forekomsten av kroniske infeksjoner i geitbesetninger.
fosteret viser ikke spesifikk makroskopisk lesjon. Barn levert nær sikt kan være dekket av brunt materiale. Klart eller blodfarget diffust ødem, blodfargede væsker i buk-og pleurhulen og petechiae på tungen, i bukkalhulen og på hover blir ofte observert.
Overføring Av Sykdommen
Infisert utskilles stort antall Chlamydiae i placenta og føtal væsker på tidspunktet for tuller og på tidspunktet for abort. Noen geiter kan kaste Klamydia i vaginale væsker fra mer enn to uker før abort til mer enn to uker etter abort. Dette kan forklare den høyere forekomsten av abort i nyinfiserte geiteflokker, siden følsomheten for infeksjon varierer i forhold til dyrets fysiologiske status. Geiter som er mindre enn 100 dager gravid er mer utsatt enn de på slutten av svangerskapet eller de som er ufruktbare. Mindre mengder Chlamydiae kan også kaste i urin, melk og avføring i flere dager etter abort.
Unge geiter født av smittede mødre kan beholde infeksjonen i flokken eller overføre den til andre besetninger. Undersøkelsen av en gruppe 27 åringer i en infisert flokk i løpet av sitt første år av livet viste hvordan de kunne spre sykdommen ved ikke å bli oppdaget av deres serologiske respons. Disse unge geiter kan deles inn i 3 grupper i henhold til svangerskap / fødsel. Den første gruppen kidded normalt et levende barn, den andre gruppen var ufruktbar eller hadde avbrutt for tidlig i svangerskapet for å bli oppdaget, og i den tredje gruppen hadde geiter avbrutt. Komplementfikseringsantistoffene (cf) fra de to første gruppene økte for å nå et maksimum (1/80-1/160) ved avlstidspunktet, og antistoffnivåene ble redusert til tiden for å tulle . Den tredje gruppen hadde EN cf antistoff titer rollen kjønns overføring av chlamydiosis av menn fortsatt må undersøkes. Men genital infeksjoner i værer og okser resultere i mannlig infertilitet og sterilitet i stedet for abort hos kvinner. Rollen som sykdommen spiller iforutsatt tarminfeksjon og dens innflytelse i epidemiologi av klamydialabort må utforskes. Den nylige identifikasjonen av molekylære markører for caprine intestinale stammer vil tillate slike studier.
Diagnose
diagnosen utføres vanligvis ved påvisning av bakterier i smør eller inntrykk av moderkaken kombinert med serologisk analyse av minst ti sera-prøver.
Farging Av Klamydia Ved Stempel, Gimenez eller Machiavello metoder er rask og kan gjennomføres enkelt i de fleste laboratorier, men tolkningen er ofte vanskelig som det krever en erfaren person å skille Chlamydia Fra Brucella og Coxiella. Immunfluorescens ved bruk av immunoglobulinkonjugater merket med fluorescerende merket isotiocyanat, øker følsomheten og spesifisiteten ved deteksjon av klamydia i smører eller placenta inntrykk.
tilstedeværelsen av klamydiaantigener i bakken placenta eller vaginale swabs samplet like etter abort kan oppdages AV ELISA med diagnostiske sett utviklet for humane c. trachomatis infeksjoner .
i humanmedisin anses polymerasekjedereaksjon (PCR) eller dens variasjon, ligasekjedereaksjon (LCR) å være de mest sensitive diagnostiske metodene som er tilgjengelige for diagnose Av Klamydia. Flere primere som er felles for Alle Typer Klamydia, Som Omp1, genet som koder for det store ytre membranproteinet, eller spesifikt For C. psittaci eller c. pecorum eller serotype – 1 c. psittaci-stammer, er utviklet for veterinærbruk. Men denne teknikken forblir dyr.
komplementfikseringstesten (cft) er den mest brukte og anses å være gullstandarden for serologisk diagnose. IMIDLERTID ER CFT ikke veldig følsom og ikke spesifikk fordi testen bruker et antigen jeg vanlig Med c. pecorum, som de fleste geiter havner i tarmen. Derfor er positive reaksjoner med titere mellom 1:10 og 1:40 ikke spesifikke for abort, men kan forholde seg til en tarminfeksjon med c. pecorum. CFT-testen bør fortrinnsvis gjøres 3 til 6 uker etter abort eller lamming, når antistoffresponsen er på sitt maksimale nivå. CFT-testen kan ikke brukes til individuell diagnose eller for å oppdage infeksjon hos unge eller menn .
Flere forsøk ble foretatt for å utvikle mer spesifikke teknikker, som ville skille Mellom c. psittaci og c. pecorum infeksjoner. Imidlertid var ingen av disse testene tilstrekkelig sensitive og spesifikke. Nylig er det utviklet en ny indirekte enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) basert på et rekombinant antigen som uttrykker en del av et protein på 80-90 kDa . Testen reagerer med serumantistoffer fremkalt tidlig mot disse svært immunogene multigene familieproteinene . Denne testen har høy følsomhet og høy spesifisitet .
Behandling
Tetracykliner påvirker replikasjonen av klamydia og kan være effektive for å forebygge abort. Injeksjon av 20 mg/kg oksytetracyklin gitt intramuskulært ved 105 og 120 dager av svangerskapet kan forhindre abort, men kan ikke hindre chlamydial shedding på tuller.
Vaksinasjon
Drepte vaksiner kan redusere forekomsten av abort, men ikke utskillelsen Av Chlamydiae ved tuller. Abort induserer en sterk nok immunitet for å motstå senere utfordringer, en levende vaksine som består av en temperaturfølsom mutant Av c. psittaci-stammer ble utviklet . Følsomme geiter ble vaksinert før parring og ingen interferens med den etterfølgende svangerskapet ble notert. Geiter ble beskyttet mot chlamydial abort og chlamydial shedding på tuller ble forhindret. Likevel, når alle geiter i en smittet flokk blir vaksinert det første året og alle erstatningsdyr blir vaksinert i påfølgende år, kan det ta ca 3 år før abortene stopper. Dette skyldes latent infeksjon hos geiter, geiter som ble smittet før vaksinering, men ikke hadde avbrutt. Vaksinasjon vil ikke endre løpet av en latent infeksjon. Disse geitene kan avbryte eller kan ungen sunn eller infisert gutt på sikt og kan eller ikke kan kaste Chlamydiae. Så lenge geiter med latent infeksjon er til stede i en flokk, er det ikke tilrådelig å slutte å vaksinere (ellers ville aborter starte på nytt), og det er heller ikke mulig å selge vaksinerte dyr, unntatt oppdrettere som vaksinerer sin flokk regelmessig.
Fremtidsutsikter
utviklingen av en vaksine, så effektiv som den nevnte levende vaksinen, som ville beskytte og tillate serologisk påvisning av infiserte geiter i vaksinerte flokker, ville være svært nyttig for kontroll av sykdommen. Uttømming av «diagnosespesifikt antigen» fra levende vaksine er foreløpig ikke et alternativ siden egnede genetiske og molekylære metoder ennå ikke er tilgjengelige, og det virker vanskelig å slette denne proteinfamilien. Av disse grunner vil en acellulær vaksine, som beskytter mot abort og utskillelse, være av interesse. Tidligere studier har vist at Både T-og B-lymfocytter er involvert i beskyttende immunitet . I murine modeller SPILLER CD8 + t-celler (Lyt 2+ i mus) en viktig rolle i beskyttelse etter overføring av primerte miltceller . Til dags Dato, C. psittaci t-celleantigener og epitoper er ikke kjent. Selv om forsiktighet må utvises ved ekstrapolering Av c. trachomatis-resultater Til c. psittaci, har flere t-celle epitoper blitt identifisert På C. trachomatis major ytre membranprotein (MOMP)
antistoffers rolle i å forebygge placental og føtal infeksjon Av C. psittaci har blitt påvist hos mus. Passiv overføring av spesifikk polyklonal sera induserer signifikant immunitet, om enn lavere enn t-cellemediert beskyttelse . Monoklonale antistoffer (Mabs) som nøytraliserer C. infeksjon med psittaci in vitro gir en bemerkelsesverdig immunitet mot gravide mus etter intravenøs infeksjon, siden abort og kolonisering av fosteret elimineres . Humoral immunitet er involvert i beskyttelse. Dens effektivitet avhenger av konsentrasjonen av spesifikke antistoffer mot riktig epitop. Alle beskyttende Mabs isolert til dags dato reagerer med termosensitive konformasjons epitoper plassert på EN MOMP oligomer .
DERFOR KAN MOMP-oligomeren være en potensiell vaksinekomponent . Det er imidlertid ikke mulig å produsere dette antigenet ved ekstraksjon fra klamydiae, da produksjonskostnadene vil overstige det en bonde ville vurdere rimelig for en caprine eller sau vaksine. Derfor må alternative metoder for vaksineproduksjon undersøkes.
genereringen av rekombinant MOMP oligomer kan være vanskelig. Genet som koder FOR MOMP, Omp1, er godt karakterisert, men høyt nivå uttrykk for full lengde genet fra en uregulert promoter er giftig For E. coli. Av denne grunn ble ulike eksperimentelle strategier for generering av de beskyttende epitoper gjennomført. Vi prøvde å etterligne de beskyttende epitoper med monoklonale anti-idiotypiske antistoffer, eller konformasjonelt begrenset peptidmimotop, men ingen av dem var effektive. Vi bestemte oss for å vurdere vaksinering av mus MED DNA-vaksine som DNA-vaksinasjon MED MOMP genbeskyttede mus mot C. trachomatis og kalkuner mot c. psittaci . Inntil nå bare delvis beskyttelse ble oppnådd, men videre forskning(på målet gen, konsentrasjon AV DNA, rute for vaksinasjon, etc.) er nødvendig for å vite om mus kan beskyttes med EN DNA-vaksine så effektivt som med levende vaksine.