Méthodes d’extraction de la chlorophylle pour la quantification des microalgues vertes colonisant les façades des bâtiments

L’apparition de microalgues sur des surfaces artificielles telles que les tuiles de toit, le béton, les façades des bâtiments et d’autres surfaces artificielles dans les zones urbaines, où elles provoquent une décoloration esthétiquement inacceptable des surfaces, représente un problème évident en raison de sa contribution à la biodétérioration et à l’altération accélérée. Jusqu’à présent, la colonisation microbienne a été enregistrée principalement macroscopiquement, et donc évaluée de manière semi-quantitative par le degré de décoloration et les données visuelles attribuées à une échelle de couleur pour l’intensité de l’infestation par les algues. Cependant, ces évaluations manquent d’interétalonnage et souffrent de modifications de couleur en raison de la coexistence de champignons ou de propriétés de fond. En utilisant la chlorophylle a comme biomarqueur spécifique des microalgues aéroterrestres, une méthode d’extraction a donc été développée pour quantifier la biomasse. Deux microalgues vertes, Stichococcus sp. et Chlorella sp., ont été isolés des façades des bâtiments, établis comme monocultures et utilisés dans la présente étude. Les échantillons d’algues sont mieux conservés par congélation dans de l’azote liquide suivie d’une lyophilisation et d’un stockage ultérieur à -18 ° C. Le diméthyl formamide (DMF) s’est avéré être le meilleur solvant d’extraction. L’homogénéisation mécanique a amélioré l’extraction jusqu’à 20 %. Cependant, l’efficacité d’extraction de la chlorophylle a était fortement spécifique à l’espèce et influencée davantage par les conditions de croissance, c’est-à-dire si les cellules étaient en phase de croissance logarithmique ou stationnaire. Pour obtenir des valeurs maximales de chlorophylle a à partir d’échantillons de composition et d’état physiologique d’espèces d’algues inconnues, il a été jugé nécessaire de faire au moins deux extractions de 24 h dans le DMF. Si la deuxième étape d’extraction a contribué > 20 % à la concentration totale de chlorophylle a, une troisième extraction de DMF a été appliquée. En utilisant ce dosage de biomarqueurs, jusqu’à 313 mg de chlorophylle a m−2 ont été obtenus à partir de façades de bâtiments, ce qui équivaut à environ 100 g de poids frais d’algues, ce qui représente une charge organique élevée.

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