Clazakizumab dans le rejet tardif médié par les anticorps: protocole d’étude d’un essai pilote contrôlé randomisé

Conception de l’étude et déroulement de l’essai

Cette étude bi-centre prospective (Medical University Vienna et Charité University Medicine Berlin) est un essai pilote de phase 2 initié par l’investigateur conçu pour évaluer l’innocuité, la tolérabilité et l’efficacité (évaluation préliminaire) de l’anticorps monoclonal anti-IL-6 humanisé clazakizumab à la fin de l’ABMR. Le sponsor de cet essai non commercial est l’Université de médecine de Vienne. En dehors de la conception de l’étude, le promoteur réalisera l’essai (en collaboration avec les partenaires de recherche), étant responsable de tous ses aspects scientifiques, éthiques, réglementaires et juridiques. Le bailleur de fonds (Vitaeris Inc., Vancouver, Canada) a établi des conditions de financement et fournira un financement externe.

Nous émettons l’hypothèse que l’administration de clazakizumab chez les greffés rénaux en plus de l’immunosuppression initiale aura un profil de sécurité acceptable, comme indiqué précédemment pour les patients atteints de maladies auto-immunes. De plus, nous émettons l’hypothèse que l’administration répétée de clazakizumab neutralisera l’inflammation et les lésions tissulaires en cours d’ABMR, en particulier l’inflammation de la microcirculation, l’alloréponse des lymphocytes B spécifiques à l’antigène leucocytaire humain (HLA) et les lésions chroniques de greffe déclenchées par les alloanticorps.

Un organigramme de l’essai est illustré à la Fig. 1. Un calendrier des événements est fourni à la Fig. 2, et une liste de contrôle signée SPIRIT 2013 est jointe en tant que fichier supplémentaire (fichier supplémentaire 1). L’étude se compose de deux sous-parties suivantes. Dans une première partie (partie A), les participants seront randomisés pour recevoir soit du clazakizumab (injection sous-cutanée de 25 mg), soit un placebo pendant une période de 12 semaines (administration de clazakizumab / placebo au jour 0 et après quatre et huit semaines). Après 11 semaines, les patients seront soumis à une première biopsie de greffe de suivi. À la semaine 12, la partie A sera terminée et la séquence de randomisation sera débloquée pour une première analyse des données. Les principaux objectifs de cette partie de l’essai sont d’évaluer l’innocuité et la tolérabilité d’un traitement de courte durée. De plus, la partie A permettra une première évaluation préliminaire de l’impact du clazakizumab sur l’inflammation associée à l’ABMR détectée dans le sang périphérique et dans l’allogreffe de l’organe rejetant. Après la semaine 12, tous les patients de l’étude entreront dans une partie ouverte de l’étude (partie B) et recevront 25 mg de clazakizumab à intervalles de quatre semaines jusqu’à la visite de fin d’étude après 52 semaines. Après 51 semaines, les patients seront soumis à une deuxième biopsie protocolaire. Les principaux objectifs de la partie B sont d’évaluer l’innocuité et la tolérabilité d’une période prolongée de traitement par le clazakizumab et l’impact à long terme de cet anticorps sur l’évolution de l’ABMR, des biomarqueurs associés au rejet et de la fonction et de la survie de l’allogreffe rénale sur une période de 12 mois.

Bien que l’étude n’ait pas été conçue pour étudier tout effet de rebond après l’arrêt du traitement par le clazakizumab, après la visite d’étude finale, tous les participants à l’étude seront surveillés pour tout signe d’aggravation de la fonction de greffe rénale lors de visites de suivi régulières toutes les quatre semaines pendant cinq mois après la dernière dose (5 × demi-vie) dans les cliniques ambulatoires.

Nous prévoyons l’achèvement du recrutement des patients après 18 mois et la finalisation de l’essai après 30 mois.

Participants

Nous inclurons des receveurs de transplantation rénale présentant des caractéristiques circulantes d’AAD anti-HLA et de biopsie de l’ABMR dans une biopsie d’indication réalisée pour un résultat positif d’AAD post-greffe et / ou une détérioration lente de la fonction d’allogreffe et / ou une protéinurie. D’autres critères d’inclusion clés sont un greffon fonctionnel ≥ 365 jours après la transplantation et un débit de filtration glomérulaire (dFGE) estimé > 30 mL/min/1.73 m2. Ce seuil eGFR a été choisi pour éviter l’inclusion de greffes présentant un degré élevé de lésions chroniques irréversibles (pour les patients présentant une lésion de greffe très avancée, un bénéfice thérapeutique durable ne peut plus être attendu). Les critères d’inclusion et d’exclusion sont énumérés dans le tableau 1.

Procédure de randomisation

Pour la partie A, les patients seront randomisés 1: 1 dans l’un des deux bras d’étude (clazakizumab versus placebo) à l’aide d’une plate-forme de randomisation basée sur le Web (https://www.meduniwien.ac.at/randomizer). La randomisation sera stratifiée par site d’étude et selon les catégories de RMA (RMA active versus RMA chronique / RMA active) pour assurer un équilibre des patients présentant ces deux types histologiques entre les deux bras.

Calcul de la taille de l’échantillon

Pour cette étude pilote, aucune estimation exacte de la taille de l’échantillon n’a été effectuée, car la taille de l’effet est inconnue (il n’existe aucune information préalable sur laquelle fonder une taille d’échantillon). Le critère d’évaluation principal sera la sécurité et la tolérabilité. Une évaluation préliminaire des résultats d’efficacité chez 20 receveurs de greffe de rein atteints d’ABMR tardive fournira les premières données sur l’effet du clazakizumab sur les paramètres cliniques, morphologiques, immunologiques et moléculaires. Les résultats respectifs (par exemple, la comparaison entre le clazakizumab et le placebo en ce qui concerne l’inflammation de la microcirculation et les scores de rejet moléculaire), y compris une évaluation de la variabilité, devraient constituer une base précieuse pour la conception de futurs essais.

Interventions

Le Clazakizumab ou le placebo seront administrés sous forme d’injection sous-cutanée unique de 1 mL chacune par du personnel d’étude qualifié en aveugle. Le clazakizumab sera fourni en flacons unidoses (25 mg / mL) pour injection et fourni par Vitaeris Inc. Le médicament placebo sera administré avec une solution saline normale pour injection et sera fourni par l’investigateur. Dans la partie A de l’essai, le clazakizumab ou le placebo seront administrés en doses de quatre semaines en injection unique de SC le jour 0 et aux semaines 4 et 8. Au cours de la partie B, tous les patients recevront des doses de clazakizumab de quatre semaines à partir de la semaine 12, puis des semaines 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, et 48 (visite de fin d’étude à la semaine 52).

Les médicaments suivants seront interdits au cours de l’étude: rituximab; eculizumab; inhibiteurs du protéasome; immunoglobuline intraveineuse; échange plasmatique ou immunoadsorption; et d’autres médicaments / traitements expérimentaux, y compris les anticorps monoclonaux anti-IL-6 / IL-6R disponibles dans le commerce tels que le tocilizumab. Les médicaments concomitants suivants seront autorisés pendant l’étude: inhibiteurs de la calcineurine (tacrolimus ou cyclosporine A); cible mammalienne de l’inhibiteur de la rapamycine (mTOR) (évérolimus ou rapamycine); mycophénolate mofétil (MMF) / mycophénolate sodique; et corticostéroïdes à faible dose (prednisolone ≤ 5 mg / jour).

Immunosuppression de base

Lors du diagnostic d’ABMR tardive, tous les receveurs (les deux bras dans la partie A) traités par un inhibiteur de la calcineurine ou un inhibiteur de mTOR, sans azathioprine ni MMF / acide mycophénolique, recevront MMF (initialement 2 × 500 mg par jour; augmentation progressive à 2 × 1000 mg par jour si toléré) pour éviter une sous-immunosuppression. Notre protocole ne permet pas les doses de MMF > 2000 mg par jour. Il y a un manque de données solides sur le dosage optimal du MMF dans la RMA; une préoccupation à cet égard peut être que des doses plus élevées de MMF pourraient augmenter considérablement la toxicité hématologique du blocage de l’IL-6 (par exemple, leucopénie). Le tacrolimus sera ajusté pour atteindre les niveaux creux cibles dans la gamme de 5-10 ng / mL, CyA à 80-120 ng / mL. Les receveurs qui avaient déjà été sevrés de stéroïdes recevront de la prednisolone à faible dose (5 mg / jour). Pour chaque participant, le type d’immunosuppression et ses modifications au cours de la période d’étude seront documentés.

Aveuglante et non aveuglante

La randomisation (partie A) sera effectuée sur les deux sites d’étude par des pharmaciens non aveugles, qui sont également responsables de la préparation du clazakizumab et du placebo (solution saline à 0,9%). Pour maintenir et garantir l’aveuglement et pour éviter le déblocage potentiel de l’allocation de groupe, les préparations de médicament réel et de placebo seront identiques en couleur, en apparence et en odeur. Les investigateurs participants, le personnel médical interagissant et les participants à l’étude seront aveuglés par l’allocation de groupe; l’équipe clinique ne pourra pas accéder à la liste d’allocation sécurisée (accès restreint protégé par mot de passe) jusqu’à ce que le dernier patient ait terminé la partie A. Un déblocage prématuré peut être nécessaire en cas d’urgence médicale, de conditions médicales graves, où les participants ne peuvent pas être traités de manière adéquate à moins que le personnel médical ne connaisse les conditions de traitement allouées, ou des rapports d’événements indésirables graves inattendus (EIG). Le déblocage peut, si nécessaire, être demandé par le data and safety monitoring board (DSMB).

Paramètres des résultats

Les mesures des résultats primaires et secondaires sont détaillées dans le tableau 2. Un calendrier des événements est fourni à la Fig. 2. Les principales mesures des résultats sont l’innocuité et la tolérabilité du clazakizumab, évaluées tout au long de la période d’étude (19 visites jusqu’à la visite EOS à 52 semaines, jour 0, semaines 1, 2, 3, 4, 8, 11, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 51, et 52). Selon les principes statistiques de la Conférence internationale sur l’harmonisation (ICH), la sécurité concerne le risque médical pour les participants, évalué par des tests de laboratoire, des signes vitaux et des EI, tandis que la tolérabilité décrit la mesure dans laquelle les EI manifestes peuvent être tolérés par l’individu (comme en témoigne le taux d’abandons dus à un manque de tolérance). Les paramètres secondaires sont la pharmacocinétique (PK; concentration de clazakizumab) et la pharmacodynamique (PD) du clazakizumab, telles qu’évaluées par des mesures en série de la protéine C-réactive (CRP). La suppression de cette protéine de phase aiguë dérivée des hépatocytes s’est avérée auparavant un marqueur de substitution précieux de l’efficacité de l’anti-IL-6. Pour une évaluation préliminaire de l’efficacité, les biomarqueurs dérivés du sang de l’ABMR (caractéristiques de l’AAD, cytokines et marqueurs d’activation / lésion endothéliale, profils des sous-populations de leucocytes du sang périphérique) seront évalués au jour 0 et après 12 et 52 semaines. De plus, nous étudierons les transcrits IL-6 / IL-6R (avant le début de l’étude et aux semaines 12 et 52), afin de clarifier si et dans quelle mesure la neutralisation de l’IL-6 module l’expression des gènes. L’effet immunosuppresseur global du clazakizumab sera évalué par surveillance de la charge de TTV dans le plasma.

L’étude comprendra deux biopsies protocolaires, une biopsie précoce après 11 semaines (avant la fin de la partie A) pour disséquer principalement l’effet du blocage de l’IL-6 sur l’inflammation de la microcirculation en comparaison directe avec le placebo, et une biopsie tardive après 51 semaines (avant la fin de la partie B) pour évaluer l’effet du clazakizumab sur la progression de la lésion chronique (étendue de la glomérulopathie de greffe, fibrose et atrophie tubulaire). Les deux biopsies seront chacune réalisées peu de temps (une semaine) avant la fin des parties respectives de l’étude, afin d’éviter toute interférence avec les analyses pharmacocinétiques détaillées prévues pour les semaines 12 et 52, respectivement. Toutes les biopsies seront évaluées pour les modèles d’expression génique typiques de l’ABMR (ATAGC, Université de l’Alberta, Edmonton; lecture principale: score ABMR moléculaire). De plus, la fonction rénale, l’excrétion de protéines, l’échec de la greffe et la mort seront évalués sur toute la période d’étude. Enfin, nous évaluerons l’impact du blocage de l’IL-6 (par rapport au placebo) sur la PK du pantoprazole en tant que médicament sonde du métabolisme hépatique dépendant du cytochrome (CYP). Le pantoprazole a été choisi, car les doses uniques sont bien tolérées et l’activité du CYP2C19 est sensible à la phénoconversion pendant l’inflammation. Au jour 0 et aux semaines 12 et 52, le pantoprazole sera administré à une dose de 20 mg par voie intraveineuse et les niveaux de médicament seront déterminés toutes les heures sur une période de 6 h. Chez les patients traités en continu par un inhibiteur de la pompe à protons, le traitement oral sera interrompu pendant trois jours avant le test PK et redémarré un jour après.

Évaluation de l’innocuité et déclaration des événements indésirables

Dans toute situation clinique, y compris les urgences, des soins médicaux adéquats seront fournis. L’évaluation de l’innocuité comprendra une surveillance attentive de tous les événements indésirables (EI), y compris les EIG. Il n’existe aucune donnée disponible sur l’innocuité et la tolérabilité du clazakizumab dans les populations transplantées. Des études antérieures, cependant, les résultats obtenus chez > 1000 patients / participants traités par le clazakizumab sont disponibles pour l’évaluation des profils de sécurité. Le tableau 3 présente un résumé des EI rapportés pour le clazakizumab à la dose de 25 mg/mois dans deux essais représentatifs de phase 2 réalisés chez des patients atteints d’arthrite.

Analyses intermédiaires

Cette étude sera surveillée par un DSMB indépendant pour évaluer l’innocuité et la qualité des données. Pour détecter les différences majeures entre les groupes en termes d’aspects de sécurité en temps opportun, les membres du conseil seront chargés d’effectuer des analyses intermédiaires après que 10 et 20 patients auront finalisé la partie A de l’étude. Le DSMB analysera les résultats enregistrés de l’EI et du laboratoire de sécurité en relation avec la séquence de randomisation.

Le DSMB peut envisager d’arrêter l’essai si le schéma global des EIG connexes ou des changements dans les résultats de laboratoire de sécurité soutiennent fortement un signal de sécurité majeur. Partie A: si six participants présentent des EIG liées (définitivement et éventuellement) (critères de toxicité communs > Grade 3 ou graves / médicalement significatifs) et / ou des niveaux considérablement élevés de paramètres hépatiques (alanine aminotransférase, aspartate aminotransférase et / ou bilirubine > 3× limite supérieure de la normale) ou une neutropénie (< 0,5 G / L), le DSMB débloquera les résultats de sécurité. Si cinq ou tous les participants font partie du groupe du clazakizumab, l’étude sera arrêtée. De même, si six EIG liées et / ou des anomalies substantielles des enzymes hépatiques ou du nombre de neutrophiles se produisent dans la même classe de système-organe, le DSMB débloquera ces EIG et si cinq ou toutes les EIG font partie du groupe du clazakizumab, l’étude sera arrêtée. Partie B (tous les participants sous traitement par le clazakizumab): si ≥ 10 personnes présentent des EIG liées au médicament ou si ≥ 10 EIG liées surviennent dans la même classe de système-organe, l’essai sera arrêté (le nombre total d’EIG liées doit également inclure les EIG liées survenant chez les personnes traitées par le clazakizumab au cours de la partie A).

Pour cet essai pilote, les définitions statistiques exactes des critères de fin prématurée de l’étude ne sont pas définies.

Contrôle de la qualité et assurance de la qualité

Les procédures de surveillance comprendront des visites régulières prédéfinies sur les deux sites d’étude. Les enquêteurs accorderont l’accès à tous les documents sources, y compris les formulaires de rapport de cas et d’autres documents liés au protocole. La confidentialité des participants sera maintenue en accord avec les réglementations locales. Le contrôleur désigné contactera l’enquêteur et lui rendra visite régulièrement et sera autorisé à avoir accès à tous les documents sources nécessaires pour vérifier les entrées dans les formulaires de rapport de cas et autres documents liés au protocole, à condition que la confidentialité des participants soit maintenue en accord avec les réglementations locales. Il incombera au contrôleur d’inspecter le formulaire de rapport de cas à intervalles réguliers conformément au plan de surveillance tout au long de l’étude, afin de vérifier le respect du protocole et l’exhaustivité, la cohérence et l’exactitude des données saisies. Les normes de surveillance exigent une vérification complète de la présence d’un consentement éclairé, du respect des critères d’inclusion/exclusion, de la documentation de l’EA et de l’enregistrement des principaux paramètres d’efficacité, de sécurité et de tolérance.

Méthodologie

Fonction rénale

L’EGFR sera évalué à l’aide de l’équation de la Collaboration en épidémiologie des maladies rénales chroniques (CKD-EPI) (mL / min / 1,73m2). L’excrétion de protéines sera documentée sous forme de rapport protéines / créatinine dans l’urine ponctuelle (mg / g).

Biopsies de transplantation

Les biopsies d’index et de suivi seront effectuées à l’aide de techniques percutanées guidées par ultrasons (1 à 2 noyaux par biopsie, aiguille de calibre 16). Après la biopsie, les patients seront surveillés de près pendant 5 à 8 h pour toute complication (mesures de la pression artérielle en série, surveillance de l’hématurie, contrôle de l’hémoglobine 4 h après la biopsie). L’histomorphologie sera évaluée sur des sections incorporées à la paraffine en appliquant une méthodologie standard. Pour la coloration immunohistochimique en C4d, nous utiliserons un anticorps polyclonal anti-C4d (BI-RC4D, Biomedica, Vienne, Autriche) et une coloration immunohistochimique minimale (score de Banff C4d ≥ 1) le long des capillaires péritubulaires sera considérée comme positive. Les biopsies seront également évaluées par microscopie électronique pour la détection des lésions de la microcirculation. Les résultats morphologiques seront évalués par des pathologistes de transplantation rénale expérimentés en aveugle pour l’allocation du traitement. De plus, les biopsies seront analysées à l’aide d’une méthode moléculaire validée à fond (MMDx™), comme proposé par le schéma de Banff. Pour chaque biopsie, une portion de 3 mm d’un noyau sera immédiatement placée dans du RNAlater, stockée à – 20 ° C et expédiée à température ambiante ou à la glace carbonique au Centre de génomique appliquée d’Alberta Transplant (ATAGC, Université de l’Alberta, Edmonton, AB, Canada) pour une analyse de réseau de gènes. Les scores moléculaires basés sur des classificateurs basés sur les lésions dérivés de l’apprentissage automatique liés au rejet (ABMRpm, TCMRt, tous les rejets) seront générés à l’aide de l’ensemble de référence d’Edmonton de > 1200 biopsies. De plus, les modèles d’expression génique seront évalués à l’aide d’une analyse d’archétype impartiale. Pour la classification de l’ABMR, tous les résultats de biopsie seront analysés dans le contexte des résultats moléculaires. Les catégories ABMR et les lésions uniques morphologiques seront définies et notées suite aux récentes mises à jour de la classification de Banff.

Détection d’anticorps HLA

Les sérums seront inactivés à la chaleur pour empêcher les artefacts in vitro dépendants du complément (phénomène de prozone) et soumis à des tests de flux d’antigène unique (tests d’antigène unique en laboratoire; One Lambda, Canoga Park, CA, USA). Les résultats des tests seront documentés sous forme d’intensités moyennes de fluorescence; une intensité moyenne de fluorescence (IMF) > 1000 sera considérée comme positive. La spécificité du donneur sera définie en fonction des résultats de typage HLA du donneur et du receveur à faible ou haute résolution. Les niveaux d’anticorps réactifs au panneau virtuel seront calculés à l’aide d’outils logiciels spécifiques (http://www.eurotransplant.org/cms/).

Cytokines et marqueurs d’activation / lésion endothéliale

Les sérums collectés aux semaines 0, 12 et 52 seront analysés pour l’IL-6, l’IL-6R soluble et les marqueurs reflétant une inflammation ou une activation et une lésion endothéliales à l’aide de réseaux de billes sur une plate-forme Luminex ou une technologie de dosage immuno-enzymatique. En parallèle, des échantillons d’urine seront testés en utilisant la même méthodologie. Pour l’analyse basée sur Luminex des biomarqueurs sériques et urinaires, nous utiliserons des Immunoessais ProcartaPlex Simplex humains selon le protocole du fabricant (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Les tests seront effectués sur un instrument Luminex 200. Les panneaux de perles comprendront des combinaisons de différents marqueurs qui reflètent potentiellement l’étendue de l’inflammation et des blessures, y compris les chimiokines (par exemple CXCL9 et CXCL10) et les marqueurs endothéliaux (par exemple VCAM-1 et E-sélectine), respectivement. Les résultats urinaires seront normalisés aux concentrations urinaires de créatinine.

Sous-populations de leucocytes

Les mécanismes sous-jacents de la RMBA, en particulier le rôle des sous-ensembles de cellules T et B périphériques, ne sont pas entièrement clarifiés. Ainsi, le phénotypage immunitaire prospectif est une approche prometteuse pour élucider davantage l’impact du blocage de l’IL-6 sur les voies de régulation immunitaire. Pour le suivi des (sous-) populations de leucocytes, nous utiliserons des panneaux de surveillance immunitaire reproductibles pour le phénotypage. Récemment, le consortium international « The ONE study » a conçu un panel standardisé (DuraClone®, Beckman Coulter, Marseille, France) pour le phénotypage immunitaire basé sur la cytométrie en flux qui a démontré des résultats robustes. Dans les kits de surveillance immunitaire DuraClone, les tubes de dosage prédéfinis contiennent une couche avec le panneau d’anticorps séché prêt à l’emploi. Jusqu’à 10 anticorps monoclonaux différents par tube permettent d’identifier les sous-populations de leucocytes (par exemple, les lymphocytes T, les lymphocytes B, les cellules tueuses naturelles) présentes dans les échantillons de sang total.

Analyse de l’expression génique

Pour l’analyse de l’expression génique, 5 mL de sang seront collectés dans des tubes d’ARN sanguin PAXgene et stockés à – 80 ° C jusqu’à l’analyse. Après décongélation, l’ARN sera isolé et transcrit en ADN complémentaire (ADNc). La quantité d’ARN / ADNc d’IL-6 ou d’IL-6R sera déterminée par réaction en chaîne quantitative par polymérase en temps réel (PCR) en utilisant le test TaqMan.

Quantification du virus Torque Teno (TTV)

L’ADN TTV sera quantifié dans des échantillons de plasma stockés en utilisant la PCR en temps réel, comme décrit précédemment.

PK de pantoprazole

La spectrométrie de masse en tandem par chromatographie liquide sera appliquée pour évaluer les niveaux et la cinétique de pantoprazole.

Méthodes statistiques

Les analyses seront effectuées selon le principe de l’intention de traiter. Les données continues seront présentées sous forme de moyenne et d’écart type (SD) ou de gamme médiane et interquartile (IQR), selon le cas, et les variables catégorielles sous forme de fréquences absolues et relatives. Les comparaisons de groupe (au départ et après trois mois) pour les données continues (niveaux de CRP, eGFR, rapport protéine / créatinine, niveaux de biomarqueurs de rejet dans le sérum et l’urine, niveaux d’expression d’IL-6 / IL-6R, caractéristiques des anticorps HLA, scores de biopsie morphologiques ou moléculaires (par exemple score ABMR)) seront analysées à l’aide de tests paramétriques (test t) ou non paramétriques (test U de Mann-Whitney), selon le cas. Le test exact de Fisher sera utilisé pour comparer les données catégorielles entre les groupes (occurrence d’EI, catégories ABMR morphologiques / moléculaires et rejet aigu prouvé par biopsie au départ et après trois mois). La survie des greffés et des patients ou la survie sans EA seront évaluées à l’aide de l’analyse de Kaplan–Meier et le test de logarithme de Mantel Cox sera appliqué pour les comparaisons de groupe. Pour les données appariées (par exemple, scores de biopsie morphologique et moléculaire après 3 contre 12 mois dans la cohorte globale), un test t apparié ou un test de Wilcoxon sera utilisé. Une valeur P bilatérale < 0.05 sera considéré comme statistiquement significatif. L’analyse de la PK du clazakizumab et du pantoprazol comprendra une description de l’évolution temporelle de la concentration en anticorps / médicament. La demi-vie d’élimination, le Tmax, le Cmax, la clairance et le volume de distribution seront calculés à l’aide d’un logiciel standard. Pour l’analyse statistique, IBM SPSS Statistics 24 (IBM Corporation, Armonk, NY, USA) et SAS pour Windows (The SAS Institute Inc., Cary, NC, USA) sera utilisé.

Enregistrement de l’étude

L’étude a été approuvée par l’Autriche (Office Fédéral de la Sécurité Sanitaire, Agence Autrichienne pour la Santé et la Sécurité Alimentaire) et les autorités de réglementation allemandes (Institut Fédéral des Vaccins et des Biomédecines, Institut Paul-Ehrlich). L’étude a été enregistrée dans la Base de données européenne sur les essais cliniques (numéro EudraCT: 2017-001604-30; enregistrement prospectif) et dans une base de données publique sur les essais cliniques (ClinicalTrials.gov NCT03444103; enregistrement rétrospectif).