Ceriodaphnia dubia blev dyrket i fire rekonstituerede vandformuleringer med hårdhed og alkalinitetskoncentrationer, der spænder fra blødt til det moderat hårde vand, der kræves af hel-spildevandstoksicitets (våde) testmetoder til dyrkning af testorganismer. Virkningerne af disse kulturformuleringer alene og i kombination med to niveauer af Cl-, SO4(2 -) og HCO3 – på reproduktion af C. dubia blev evalueret med standard tre-brood test. Reproduktion blev signifikant reduceret, når testvand havde lavere hårdhed end kulturvand. Reproduktion var imidlertid ikke signifikant anderledes, når dyr dyrket i vand med lav hårdhed blev udsat for moderat hårdt vand. Kulturvandets hårdhed påvirkede ikke C. dubias følsomhed signifikant over for de tre anioner. Omvendt reducerede øget hårdhed i testvand signifikant toksiciteterne af Cl-og SO4(2 -) med HCO3-toksicitet efter det samme mønster. Alkalinitet udviste ingen konsistent effekt på CL – og SO4(2-) toksicitet. Den fysiologiske belastning ved at placere dyr dyrket i moderat hårdt vand i blødere testvand kan bidrage til marginale svigt i ellers ikke-giftige spildevand. Standard vådprotokollen bør revideres for at gøre det muligt for kulturen af C. dubia under lavere hårdhedsforhold bedre at repræsentere lokale overfladevandskemikalier.