omdannelse af kolesterol til pregnenolon medieres af kolesterol sidekædespaltning (20,22 desmolase) spaltning (SCC), p450scc. Mangelfuld SCC-aktivitet forårsager medfødt lipoid adrenal hyperplasi (også kendt som 20,22 desmolase-mangel), en potentielt dødelig defekt i syntesen af alle steroidhormoner. For at undersøge mulige genetiske defekter, der forårsager denne sygdom syntetiserede vi fire oligodeoksyribonukleotider indeholdende 63 Til 72 baser svarende til dele af bovint komplementært DNA (cDNA) sekvens for P450scc. De bovine oligonukleotider blev mærket og anvendt direkte til at undersøge sydlige blots af normalt humant genomisk DNA, hvilket afslørede et mønster, der indikerer, at der er et enkelt p450scc-gen i det humane genom. Hybridisering til Nordlige blots af normal human og bovin adrenal messenger RNA indikerer, at P450scc messenger RNA er omkring 2,0 kilobaser lang i begge arter. Hybridiseringer af oligonukleotiderne til genomisk DNA fra tre ikke-relaterede patienter med SCC-mangel påviste ikke en deletion i det humane P450scc-gen. De bovine sekvensoligonukleotider blev derefter brugt til at isolere en human p450scc cDNA-klon. Det isolerede p450scc cDNA-fragment indeholder 818 baser, der koder for 239 aminosyrer af proteinet, translationstermineringssignalet og 98 baser i det 3′ uoversatte område. Sekvensen af denne carboksy-terminale halvdel af det humane p450scc-protein er 72% homolog med bovin-sekvensen og indeholder en yderligere aminosyre, der ikke findes i bovin P450scc; de humane og bovine nukleotidsekvenser er 81% homologe. Gentagelse af de genomiske DNA-blottingstudier med cDNA-sonden gav de samme resultater opnået med bovin-sekvensoligonukleotidproberne, hvilket bekræfter, at SCC-mangel ikke skyldes en deletion i regionerne af p450scc, der hybridiserer med proberne. Lange, kemisk syntetiserede heterologe sekvensoligonukleotider indeholdende ukendte antal basismismatch med humane sekvenser kan således bruges til at studere humane gener, så adgang til et cDNA ikke er nødvendigt for sådanne undersøgelser.