dette forslag tilføjer struktur-funktion forholdet mellem de vitamin K-afhængige blodkoagulationsproteiner, med særlig vægt på gamma carboksiglutaminsyre. Dette program, der involverer fire separate, men relaterede projekter, har udviklet sig fra tidligere arbejde udviklet i den foregående periode. I Projekt #1, struktur-funktion forholdet mellem faktor IK og protrombin vil blive undersøgt. Mutante former af disse proteiner, opnået fra patienter med arvelige strukturelle og funktionelle abnormiteter af disse proteiner, vil blive oprenset ved hjælp af konformationsspecifikke antistoffer, fragmenteret ved proteolyse, og de mutante peptider sekventeret. Den molekylære defekt i hvert mutantprotein vil blive etableret og korreleret med funktionelle defekter. I Projekt #2 vil det nyopdagede KC4-blodplademembranprotein være fuldt karakteriseret og lokaliseret til specifikke subcellulære organeller. Funktionen og bindingsegenskaberne af dette protein, der kun udtrykkes på aktiverede blodplader, vil blive bestemt. Projekt #3 vil definere Gla ‘ s rolle i protrombin. En ny model af GLA -, metal-og membraninteraktion i protrombin ved hjælp af immunokemiske og spektroskopiske tilgange vil blive evalueret. Membranbindingsegenskaberne og Gla-fordelingen af en række delvist carboksylerede protrombiner bør give indsigt i dette problem. Projekt #4 er en direkte klinisk anvendelse af vores immunokemiske undersøgelser. Ved hjælp af antistoffer, der er specifikke for fuldt carboksyleret protrombin (NPT) og des-gamma-CARBOKSYPROTHROMBIN (APT), vil vi fortsætte et klinisk forsøg for at evaluere disse analyser som en forbedret metode til overvågning af oral antikoagulant terapi. K-vitaminmangel hos nyfødte og deres mødre vil blive undersøgt med håb om at udvikle enkle rationelle tilgange til eliminering af hæmoragisk sygdom hos den nyfødte. Desuden vil analyse af KC4-antigenet, specifikt for aktiverede blodplader, blive undersøgt som en metode til påvisning af den pretrombotiske tilstand. Disse grundlæggende og kliniske projekter skal bidrage til forståelsen af denne gruppe af proteiner, give nye metoder til diagnosticering af den pretrombotiske tilstand og K-vitaminmangel og udvikle yderligere data for at retfærdiggøre brugen af NPT-analysen over protrombintiden reducerer signifikant sygelighed/dødelighed forbundet med oral antikoagulationsbehandling.