sammenligning af SEC-og CE-SDS-metoder til overvågning af hængselfragmentering i IgG1 monoklonale antistoffer

fragmentering af monoklonale antistoffer er en kritisk kvalitetsattribut, der rutinemæssigt overvåges for at vurdere produktets renhed og integritet fra udvikling til kommercialisering. Spaltning i det øvre hængselregion af IgG1 monoklonale antistoffer er et almindeligt fragmenteringsmønster, der er bredt undersøgt ved størrelse eksklusionskromatografi (SEC). Kapillærelektroforese med natriumdodecylsulfat (CE-SDS) er en veletableret teknik, der almindeligvis anvendes til overvågning af antistoffragmenter, men dens sammenlignelighed med SEC i overvågning af hængselfragmenter er ikke blevet fastslået indtil nu. Vi rapporterer en karakteriseringsstrategi, der fastlægger sammenhængen mellem hængselregionfragmenter analyseret af SEC og CE-SDS. Monoklonale antistoffer med forhøjede hængselsfragmenter blev genereret under lave pH-stressbetingelser og analyseret af SEC og CE-SDS. Masserne af de genererede fragmenter blev bestemt af LC-MS. Elektroforetisk migration af hængselfragmenteringsprodukterne i CE-SDS blev bestemt ud fra deres masseværdier. Sammenlignende vurdering af fragmenter efter SEC og CE-SDS viste lignende korrelation med inkubationstiden. Denne undersøgelse viser, at CE-SDS kan anvendes som en surrogatteknik til SEC til overvågning af hængselregionfragmenter. Vigtigst er det, at kombination af disse teknikker kan bruges til at opnå omfattende forståelse af fragmentrelaterede egenskaber ved terapeutiske proteinprodukter.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.