Oncology Letters

introduktion

lungekræft er den mest almindelige kræft efter brystog tyktarmskræft, over hele verden (1). Denforekomst af lungekræft svarer til dødeligheden for dettesygdom på grund af den høje dødelighed af lungekræft. Ifølge de data, der er tilgængelige fra Det Internationale Agentur for forskning onCancer, forventes de årlige lungekræftdødsfald at stige tilomkring 10 millioner inden 2030 (2).Den mest almindelige type lungekræft histologisk eradenocarcinom, som tegner sig for næsten 50% af alle lungekræft(3).

histologisk er der to hovedtyper af lungecancer, småcellet lungecarcinom (SCLC) og ikke-SCLC (NSCLC). SCLC tegner sig for ca.20% af alle tilfælde af lungekræft, mensclc tegner sig for næsten 80% af tilfælde af lungekræft (4). Der er tre histologiske undertyper afnsclc: i) pladecellecarcinom (SCC), ii) adenocarcinom, andiii) storcellet lungecarcinom, der hver tegner sig for henholdsvis 25, 40 og 15% af de samlede NSCLC-tilfælde (5).

på trods af anerkendelsen af lungekræft som en afde mest aggressive kræftformer er der langsomme fremskridt ikliniske resultater, selvom et stort antal nye lægemidler er tilgængelige. De vigtigste spørgsmål for denne ulempe iklinisk håndtering af lungekræft er utilgængeligheden af valideretserum tumormarkører, som er nyttige i både diagnosen ogprognose af sygdommen (6). Mangetyper af malignitet forårsager pleural effusioner, og kræft, der mesthyppigt metastaserer til pleura er lunge-og brystcarcinomerog lymfomer. Selvom den cytologiske undersøgelse af pleuraleffusion betragtes som en standardmetode til diagnose, er dens følsomhed typisk kun 50-70% (7,8).

et antal tumormarkører, herundercarcinoembryonisk antigen (CEA), kulhydratantigen 125 (CA125) og CYFRA21-1,Et fragment af cytokeratin 19 (CK19), er blevet vurderet som bedre og mere nøjagtige tumormarkører i serum såvel som pleural væske i mange undersøgelser (7,8). Det er også blevet observeret, at en kombination af to eller flere markører er kraftigere end en enkelt markør. Imidlertid blev den virkelige diagnoseforudsigelighed af disse markører ikke vurderet i mange afdisse undersøgelser, da den cytologiske tilstedeværelse af tumorceller blev detekteret i patienternes pleurale effusioner (9-11). Mange af de ovennævnte markører viste sig at være forhøjet i pleuraleffusioner hos kræftpatienter sammenlignet med de godartede pleuraleffusioner (7). Pleuraleffusion-afledte humane lungecancerceller viste sig at være mereinvasive og metastatiske end kræftceller fra primære læsioner, og denne forskel kan være relateret til epithelial-mesenkymal overgang(EMT).

EMT, som normalt spiller en vigtig rolle iembryonisk vævsmorfogenese og ved fibrose efter skade(12,13), genaktiveres uhensigtsmæssigt undervoksen under visse patologiske tilstande, såsom kræft, ogbidrager til tumormetastase (13). EMT er kendt for at formidle de mange ændringer og den resulterende fænotype modulation i tumorarkitektur. EMT er karakteriseret ved forstyrrelsen afintercellulær adhæsion, forhøjet tumorcellemotilitet, faldetmodtagelighed for anoikis og apoptose og ved frigivelse af cellerfra epitelvæv (9-11). De frigivne tumorceller, som erresistente over for anoikis, antager mesenkymlignende fænotype, der kan udstedes til migration, invasion og formidling, alt sammenbidrager til metastatisk progression. I mange tilfælde er gradenaf EMT af kræftceller bestemmer sværhedsgraden af kræft (14). EMT har også vist sig at være involveret i resistens over for anoikis, hvilket er kritisk ihæmning af kræftmetastase i forskellige faste tumorer (15).

Cytokeratiner (CKs) er almindelige tumormarkører og erde vigtigste strukturelle elementer i cytoskelettet i epitelceller, og på basis af strukturelle egenskaber CKs er der 20subtyper. Af disse er CK19 en opløselig og sur type i CK og udtrykkes i epitelforingen i bronchialtræet og vides at være overudtrykt i lungecancervæv (16). Der er forhøjet ck19-nedbrydning ineoplastisk transformerede epitelceller på grund af øgetcaspase-3-aktivitet, og de proteolytiske fragmenter, især CYFRA21-1,frigives i blodet. CK19 anses for at være tæt forbundet med lungekræft; nogle undersøgelser rapporterede imidlertid, at ck19-ekspression var negativ i visse lungekræft (9-11). Ck19ekspression i nogle lungecancercellelinjer blev reduceret eftertransformerende vækstfaktor (TGF)-kurr-induceret EMT (17). Cirkulerende niveauer af ck19 fragmenterherunder CYFRA21-1 afspejler sandsynligvis omfanget af cytoskeletdannelse i kræftceller og kan også associeres med graden aftumordifferentiering mod pladeepitel (16).

i denne undersøgelse blev tumorprøver fra 111 lungekræftpatienter ansat, og forekomsten af CK19-negativekspressere i forskellige typer lungekræft blev undersøgt, såvel som om induktion af EMT i de primære fokuscellerpåvirker ekspressionen af CK19. Vi undersøgte også, omherck19-negative lungekræft var mere invasive og metastatiske.

patienter og metoder

generelt

alle 111 patienter blev udvalgt i henhold til 7thversion TNM-iscenesættelsen, beskrevet af American Joint Committee onCancer and Union for International Cancer Control i 2007 (9-11). Lungecancerpatienter diagnosticeret med forskellige typer lungekræft på fase IV og behandlet med tyrosinkinasehæmmere eller platin(75 mg/m2) og docetaksel (75 mg/m2)-baseretkemoterapi blev rekrutteret i denne undersøgelse. Patienterne blev indlagt på Subei People ‘ s Hospital mellem januar 2013 og december 2014.

undersøgelsen blev godkendt af Ethics Committee of Subei People ‘ s Hospital. Skriftligt informeret samtykke blev opnåetfra hver deltager. Denne undersøgelse er i overensstemmelse med’ Verdenslægeforeningens etiske kodeks ‘ (Helsinki-erklæringen, 1964).De 111 patienter omfattede 90 mænd (44-82 år) og 21 kvinder(40-75 år). Patientkarakteristika er vist i tabel I. I alt 56 adenocarcinom, 21scc, 32 SCLC og 2 tilfælde af adenoskvam karcinom blev identificeret.De tilmeldte patienter matchede følgende kriterier: Karnofskyscore med en >60-årig forventet levetid på > 3 måneder, ingen immunsystemsygdomme, normalt elektrokardiogram, normal lever og nyrefunktion og modtager ingen antitumorbehandling inden for en måned førtil undersøgelsen. Tyrosinkinasehæmmerbehandlede tilfælde var afadenocarcinomtype.

blodprøver blev indsamlet fra alle patienterneog sera blev adskilt og frosset indtil efterfølgende analyse.Pleural effusionsprøver blev indsamlet ved at følge de godkendte procedurer og blev undersøgt cytologisk og behandlet tilimmunohistokemi.

immunhistokemi

Tumorvævsprøver (primære foci) blev behandlettil immunhistokemi til påvisning af CK19, E-cadherin ogvimentin. Primære fokusvævsprøver blev fastgjort i formalin ogindlejret i paraffinblokke. Flere sektioner (4 liter) fra hverprøve blev anvendt til immunhistokemisk analyse. Prøverne blev behandlet med hæmatoksylin og eosin. Anti-CK19, anti-E-cadherin oganti-vimentin antistoffer blev købt fra TIYO BiotechnologyCorporation (Shanghai, Kina). Anti – ck19 kanin polyklonalt antistof (katalognr. 98123) blev anvendt ved en fortynding på 1: 50; anti-E-cadherin ck19 kanin polyklonal (katalognr. 86603) antistof blev anvendt ved en fortynding på 1: 100; og anti-vimentin ck19rabbit polyklonalt antistof (katalognr. 40651) blev anvendt ved fortynding på 1: 500 efterfulgt af inkubation med peberrodkonjugeret anti-IgG (Beijing CellChip Biotechnology Co., Ltd., Beijing, Kina) ved en fortynding på 1:100. Farveudvikling varudført ved anvendelse af 3,3′-diaminobensidinsubstrat.

udseende af tanpartikler i cellemembranen ogcytoplasma blev betragtet som positiv for henholdsvis ckl9, E-cadherin ogvimentin. Immunhistokemiske resultater blev bekræftetaf to patologer ved hjælp af en dobbeltblindet metode.

Markøranalyser

a Roche E601 Cobas automatic chemiluminescensimmunoassay analysator (Roche Diagnostics, Basel, Sverige) blev anvendt til at måle serum cea, CA125, neuronspecifik enolase (NSE),kursfetoprotein (AFP) og CYFRA21-1 i patientsera og pleuraleffusioner. CYFRA21-1 >3,3 ng/ml, NSE >15,2 ng/ml, CEA >5,0 ng/ml, CA125 >35,0 ng/ml og AFP >7 ng/ml blev overvejetpositive værdier.

TGF-kurt1-induceret EMT i lungetumorceller

tumorceller blev isoleret fra primært fokusvæv opnået fra patienterne. Primære celler blev isoleret fraprimært tumorvæv og pleural effusion fra den samme patient ogblev dyrket. Cellerne blev isoleret i to trin: i)centrifugering gennem lymfocytseparationsmedium (specifikgravitet af 1.077), efterfulgt af dyrkning i rpmi-1640 mediumindeholder 20% føtal bovint serum (Beijing LabLead BiotechnologyCorporation, Beijing, Kina) i 2 dage. ii) efterfølgende 40/20% Percoll (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Beijing, Kina) blev brugt som centrifugering i andet trin tiladskillelse af cellerne. De opsamlede celler blev dyrket igen irpmi-1640 dyrkningsmedium indeholdende 20% føtalt bovint serum oginkuberet ved 37 kg C under 5% CO2-atmosfære indtil 70-80% sammenløb. Cellerne blev behandlet med TGF-kurt1 (købt frashanghai Keksing Biotech Co., Ltd., Shanghai, Kina) ved 5 ng/ml for24 timer. cellerne blev derefter vasket og behandlet. Immunhistokemiskanalyse for E-cadherin, CK19 og vimentin, blev udført førog efter behandling med TGF-kurs1, som beskrevet ovenfor. Tilstedeværelse ellerabsensen af disse markører blev scoret som henholdsvis positiv eller negativ.

statistisk analyse

P < 0,05 blev betragtet som statistiskbetydelig.

resultater

patientkarakteristika

de 111 patienter omfattede 90 mænd og 21 kvinder med en lignende aldersfordeling (40-80 år). Patienterne blev diagnosticeret med stadium IV lungekræft. Histologisk var de fleste tilfælde adenocarcinomtype, efterfulgt af SCLC og SCC, både hos mandlige og kvindelige patienter (TableI). Der var kun to tilfælde af adenoskavt carcinom iDenne patientprøve. Størstedelen af patienterne modtogkemoterapi baseret på platin – og docetakselbaseret kemoterapi,mens de med epidermal vækstfaktorreceptor gevinst-af-funktionmutationer blev administreret tyrosinkinasehæmmer (TKI) terapi(Gefitinib). Kun et lille antal patienter (5 mænd og 1 kvinde)modtog ikke disse terapier på grund af økonomiske begrænsninger.

histologi af den primære tumorvæv

tumorvæv fra 111 patienter blev undersøgtimmunohistokemisk for ck19-ekspression. Mens forhøjet Ck19-ekspression blev observeret i visse lungekræft, er et tab af CK19 sandsynligvis forbundet med EMT (17). I den foreliggende undersøgelse var ck19-ekspression fraværende i mange SCLC-tumorer,>50% hos mænd og 100% hos kvinder. Som sådan var ck19-ekspressionrelativt nedsat i SCLC-tumorer i sammenligning med andre lungecancers (Fig. 1). 31% af tumorer fra mandlige patientervar negative for CK19, hvilket var meget lavere for kvinder (7%).Samlet set viste SCLC-tumorvæv større sandsynlighed for Emtkarakteristika (tabel i). Der var en tilsyneladende reduktion i andelen af ck19-negative Ekspres primære tumorer såvel som pleural effusion celler efter TKItherapy, sammenlignet med ubehandlede eller kemoterapibehandlede patienttumorer, i alle typer lungekræft (Fig. 2).

CYFRA21-1 niveauer

Serum og pleural effusion CYFRA21-1 niveauer erbetragtes som vigtige markører for malignitet for mange typerkræft, især for lungekræft. Da CYFRA21-1 er afragment af CK19, undersøgte vi serum og pleural effusionCYFRA21-1 niveauer som en funktion af tab af ck19 ekspression ipleural effusion celler. Resultaterne viste, at når CK19 blev udtrykt stærkt i de primære fokus-og pleurale effusionsceller,CYFRA21-1-niveauer var høje, og når ck19-ekspression gik tabt iprimære tumorer og/eller pleural effusionsceller, CYFRA21-1-niveauerfaldt signifikant i alle typer kræft (Fig. 3). Derudover var CYFRA21-1-niveauermeget højere i serum og pleural effusion hos patienter medck19-positive SCC-tumorer sammenlignet med andre typer tumorer(Fig. 2). De høje niveauer afcyfra21-1 i SCC-patientsera og pleural effusion afspejler sandsynligvis den stærke tilstedeværelse af CK19 i positive tumorer (Fig. 1). Resultaterne antydede også, at serum CYFRA21-1 niveauer kun blev forhøjet marginalt i lungecancers sammenlignet med de godartede baseniveauer (1,3–2,6 ng/ml) med undtagelse af SCC, hvor stigningen var meget over normalområdet (Fig. 3). Imidlertid blev CYFRA21–1-niveauer stærkt forhøjet over det godartede interval (6,5-35 ng/ml)(18) i pleural effusion af lungekræftpatienterne, hvilket antyder, at pleural effusionsmålingaf CYFRA21-1 er en optimal tumormarkør.

andre serummarkører

markører for tumor malignitet inklusive CA125, CEA,NSE og AFP blev målt i sera hos nogle få af patienterne, og der var betydelig variation blandt patienterne og niveauerne.For patienter med ADC var gennemsnittet af CA125, CEA, NSE og AFP således 23.6±10.9, 48.3±39.7, 10.1±2.4, 2,1 kr. 0,6. For patienter med SCC var gennemsnittet af CA125, CEA, NSE og AFP 57.1±31.5, 5.6±2.7, 20.8±2.5, og 2,6 liter 0,4 henholdsvis ingen af demarkører var signifikant forskellige fra det normale interval (Fig. 4).

induktion af EMT I primære focusceller af TGF-kurt1

TGF-kurt1 ved inkubering med primære fokus lungetumorceller skabte ændringer, der var relevante for EMT, i mange tilfælde. Således inæsten 40% af adenocarcinomtumorer blev CK19-positive primære focusceller induceret til at miste ck19-ekspression og gennemgå EMT byTGF-kurt1. Denne andel af tumorer var 28% for SCC og 50% for SCLC(Fig. 5). Således er SCLC primære focusceller inducerbare til at gennemgå EMT af TGF-kurr1 lettere. Som nævnt ovenfor viser SCLC-primærceller et højere niveau af EMT selvuden induktion af TGF-lut1 (TableI).

et andet sæt vigtige markører for EMT er tab AFE-cadherin og gevinst på vimentin-ekspression. E-cadherin blev fundet atvære negativ i næsten 37,5% af adenocarcinom primære tumorceller,52,3% af SCC tumorceller og 22% af SCLC tumorceller (Fig. 6), før behandling med TGF-kr1. Bycontrast var vimentinekspression i disse tumorer positiv i 23,2% af adenocarcinomtumorceller, 33,3% af SCC-tumorceller og 31,3% SCLC-tumorceller (Fig. 7). Følgendebehandling af primære fokusceller med lungetumor med TGF-kurt1 var tabet af e-cadherinekspression altid forbundet med en stigning invimentinekspression (Fig. 8). Procentdelen af SCC-tumorer, der viste dette svar på TGF-karrus1 (40% ændring i e-cadherinekspression og 57% i vimentinekspression) varhøjere end for adenocarcinom og SCLC (Fig. 6).

Diskussion

sammenlignende ekspressionsstatus for CK19 i primærlungekræftvæv og i pleurale effusioner kan være nyttige ved vurdering af metastaseringsevnen hos disse kræftceller. Ifa-patientens pleurale effusionsceller har således et højere niveau af negativekspression af CK19 sammenlignet med den samme patients primærelungekræftvæv antages det, at den negative Ck19ekspression er forbundet med invasion og metastase (19). I den foreliggende undersøgelse havde en storandel af patienter med SCLC-tumorer tumorvæv uden nogenekspression af CK19 og pleurale effusionsceller hos disse patienterviste en mangel på ck19-ekspression, hvilket indikerer en høj grad afmetastase i denne type lungekræft, hvilket er en typiskkarakteristisk for SCLC (20). Der er foreslået flere årsager til tabet af ck19-ekspression, herunder ændret ekspression og forbedret proteolytisk nedbrydning(21).

da CYFRA21-1 er et fragment af CK19, serum ogpleural effusion CYFRA21-1 niveauer betragtes som vigtige markøreraf malignitet for mange typer kræft, især for lungecancer (7,21). Det er dog svært at være sikker påvedrørende kræftdiagnose baseret på cirkulerende CYFRA21-1 niveauer somder er tilfælde af lungekræft, hvor der er nedsat CYFRA21-1niveauer, mens der er en stigning i andre tilfælde (7,21).Fra de nuværende fund faldt serum CYFRA21-1 niveauer imidlertid med den øgede mulighed for EMT, som påvist ved tab af ck19-ekspression i pleurale effusioner i sammenligning medtilsvarende primært tumorvæv. Således serum CYFRA21-1 niveausammen med ck19 ekspressionsstatus for kræftceller fra primærfokus og pleural effusioner kan positivt identificere invasionenog metastaseevne hos lungecancercellerne. Andre mærker, herunder CA125, CEA, AFP og NSE, som almindeligvis anvendes til kræftdiagnose, var ikke konsistente i denne vurdering.

metastaseringsevnen tildeles de primære kræftceller via EMT, og en af de primære faktorer, der kan inducere EMT, er TGF-karr1. Selvom TGF-kar1 normalt fungerer som en hæmmer af epitelcelleproliferation, på grund af ændrede signalveje i mange kræftceller virker TGF-kar1 for at forbedre spredning af kræftceller, herunder lungecancerceller(22). Ud over at forbedrekræftcellevækst er TGF-kurs1 kendt for at fremme EMT i kræftcellerog bidrager således til kræftcelleinvasion og metastase. Det har været antydet, at i de tidlige stadier af primær tumordudvikling i epitelvæv virker TGF-kur1 som en hæmmer af tumorvækst via cellecyklusstop og apoptose (23,24).Efterhånden som tumorprogression forekommer, er der imidlertid i de senere stadier aftumorudvikling enten inaktivering af TGF-lut1signaleringsvejen eller afvigende regulering af cellecyklussen, og kræftcellerne bliver resistente over for væksthæmning af TGF-lut1(23,24). Under disse betingelser anvendes TGF-kurt1som vækstpromotor af kræftcellerne (25). Ekspressionen af mRNA og protein ofTGF-kur1 var stærkt forhøjet i mange typer kræft, herunderdem i bugspytkirtlen, tyktarmen, maven, lungen, endometrium, prostata,bryst, hjerne og knogle (26).

i betragtning af, at tilbøjeligheden til at gennemgå EMT erforbedret i nærvær af et cytokin, såsom TGF-kurt1, som er kendt for at være forhøjet hos lungekræftpatienter, undersøgte vi Eminducibiliteten af primære fokusceller, tidligere vivo, af TGF-kurt1.Afhængig af den anvendte EMT-markør havde SCLC-og SCC-tumorer en højere evne til at gennemgå TGF-lut1-induceret EMT. SCLC primære fokusceller er inducerbare til at gennemgå EMT af TGF-kurs1 lettere, hvis vi overvejer tab af ck19-ekspression. Der er faktisk en højere gradaf EMT, hvad angår mangel på CK19 i SCLC primære tumorceller. Bykontrast, SCC tumor primære celler reagerer ved tab af E-cadherinog forhøjede vimentin udtryk. Nedregulering af E-cadherin sammen med opreguleringen af N-cadherin karakteriserer Emtprocessen, og disse ændringer i ekspressionen af disse proteiner er forbundet med erhvervelsen af resistens over for apoptose oganoikis (27,28).

sammenfattende antyder resultaterne af den foreliggende undersøgelse, at invasionen og metastasen af lungetumorceller kan vurderes ved at have et komplet billede af serum CYFRA21-1 sammen med ck19-ekspressionsstatus for primære fokusceller og pleuraleffusion. Denne vurdering kan forbedres yderligere ved at undersøge, om de isolerede primære fokusceller er tilbøjelige til at undergoTGF-kurr1-induceret EMT i cellekultur.

anerkendelser

forfatterne vil gerne anerkende teknisk bistand fra Dr Yong Chen og Dr Jiksin Jiang.

	Jemal A, Bray F, Center MM, Ferlay J, Varde og Forman D: Global kræftstatistik. CA kræft J Clin.61:69–90. 2011. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Haghgoo SM, Allameh A, mortas E, GarssenJ, Folkerts G, Barnes PJ og Adcock IM: farmakogenomik ogmålrettet behandling af kræft: fokus på ikke-småcellet lungekræft.EUR J Pharmacol. 754:82–91. 2015. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Morales – Oyarvide V og Mino-Kenudson M:High-grade lunge adenocarcinomer med mikropapillær og / eller solidmønstre: en gennemgang. Curr Opin Pulm Med. 20:317–323. 2014.Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Burdett S, Stuart LA og Rydjevska L: Asystematisk gennemgang og meta-analyse af litteraturen: Kemoterapiog kirurgi versus kirurgi alene i ikke-småcellet lungekræft. JThorac Oncol. 1:611–621. 2006. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Travis VD: patologi af lungekræft. ClinChest Med. 2365–81. (viii) 2002. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bastasy AE, Asouny mig, Mohammed G, Allah AA og Behiry E: Serum cytokeratin 19 fragment på forhåndlungekræft: kunne vi til sidst have en serumtumormarkør?Ecancermedicalscience. 8:3942014.PubMed / NCBI
	Tsao SM og SuCC: diagnostisk værdi af tumormarkører i lungadenocarcinomassocierede cytologisk negative pleurale effusioner.Kræft Cytopatol. 121:483–488. 2013. Se Artikel: Google Scholar : PubMed / NCBI
	en af de mest almindelige årsager til malign pleural effusion er den diagnostiske nøjagtighed af tumormarkører for malign pleural effusion: en meta-analyse. Thorax. 63:35–41. 2008.Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	evaluering af syv tumormarkører i pleural væske tildiagnose af maligne effusioner. Br J Kræft. 81:1059–1065. 1999.Se Artikel: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Cl, Su CC og TsengCE: diagnostisk værdi af Her-2/neu, Cyfra 21-1 og carcinoembryonicantigen niveauer i maligne pleural effusioner af lungadenocarcinom. Patologi. 42:224–228. 2010. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	p: begrænset additiv værdi af pleural fluidcarcinoembryonisk antigenniveau i ondartet pleural effusion.Respiration. 67:24–29. 2000. Se Artikel: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Hay ED: den mesenkymale celle, dens rolle iembryoet og de bemærkelsesværdige signalmekanismer, der skaber det.Dev Dyn. 233:706–720. 2005. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino M, Micheli P, Pallotti f andGiordano F: patologisk relevans af epithelial og mesenkymalphenotype plasticitet. Pathol Res Pract. 195:379–389. 1999.Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino M, Rubino B og Ballabio G: Therole af epithelial-mesenkymal overgang i kræftpatologi.Patologi. 39:305–318. 2007. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Chunhacha P, Sriuranpong V ogchanvorachote P: epitel-mesenkymal overgang mediatesanoikis modstand og forbedrer invasion i pleuraleffusion-afledte humane lungecancerceller. Oncol Lett. 5:1043–1047.2013.PubMed / NCBI
	Kosacka M og Jankovska R: Sammenligning af cytokeratin 19 ekspression i tumorvæv og serum CYFRA 21–1niveauer i ikke-småcellet lungekræft. Pol Arch Med Vækket. 119:33–37.2009.PubMed / NCBI
	TGF-re-1 og Smad7 genoverførsel på fænotypiske ændringer af rotte alveolære epitelceller. Celle MolBiol Lett. 12:457–472. 2007. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Romero S, Fern C, Arriero JM, EspasaA, Candela a, Martinus C og S-Lønnus J: CEA, CA 15-3 og CYFRA21 – 1 i serum og pleural væske hos patienter med pleural effusioner.Eur Respir J. 9: 17-23. 1996. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Fujisue M, Nishimura R, Okumura Y, TashimaR, Nishiyama Y, Osako T, Toyosumi Y og Arima N: Kliniskbetydning af ck19 negativ brystkræft. Kræft (Basel).5:1–11. 2012. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	mc, Byers LA, Minna JD og RudinCM: småcellet lungekræft: Vil de seneste fremskridt føre til forbedretresultater? Clin Kræft Res. 21: 2244-2255. 2015. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Ono a, Takahashi T, Mori K, Akamatsu H, Shukuya T, Taira T, Kenmotsu H, Naito T, Murakami H, Nakajima T, etal: prognostisk virkning af serum CYFRA 21-1 hos patienter med avanceretlung adenocarcinom: en retrospektiv undersøgelse. BMC kræft. 13:3542013.Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bachman KE og Park BH: Duel natur ofTGF-beta signalering: Tumor suppressor vs. tumorpromotor. Curr OpinOncol. 17:49–54. 2005. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	TGF-krissignalering: positive og negative virkninger på tumorigenese. CurrOpin Genet Dev. 12:22–29. 2002. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Akhurst RJ og DERYNCK R: TGF-Kristian signaleringi kræft-et tveægget sværd. Tendenser Celle Biol. 11: S44-S51. 2001. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	SB: Transformerende vækstfaktor-beta i kræft og metastase. Kræftmetastase Rev. 25: 435-457. 2006. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guld LI: rollen for at transformere vækstfaktor-beta (TGF-beta) i kræft hos mennesker. Crit Rev Oncog. 10:303–360.1999.PubMed / NCBI
	Guadamillas MC: overvinde anoikis-veje til forankringsuafhængig vækst i kræft. J Cell Sci. 124:3189–3197. 2011. Se Artikel: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Ko h, Kim S, Jin CH, Lee E, skinke s, Yook JIand Kim K: proteinkinase kasein kinase 2-medieret opregulering AFN-cadherin giver anoikis resistens over for esophageal carcinomaceller. Mol Kræft Res. 10: 1032-1038. 2012. Se artikel: Google Scholar: PubMed / NCBI