abstrakt
vi har brugt et totrins klonalt kultursystem til utvetydigt at demonstrere, at individuelle primitive lymfohemopoietiske progenitorceller har kapacitet til differentiering langs enten myeloid eller B-lymfoid afstamning. Stærkt berigede murine marvceller blev belagt individuelt i kultur ved mikromanipulation i nærvær af pokeev mitogenstimuleret miltcellekonditioneret medium, erythropoietin, stålfaktor (SF) og interleukin (IL) 7. Femogfyrre procent af de enkelte celler dannede primære kolonier, der udtrykte flere hæmopoietiske slægter. Når alikvoter fra individuelle kolonier blev repleret i sekundær methylcellulosekultur indeholdende SF og IL-7, gav 41% af de primære kolonier anledning til lymfocytkolonier. Cellerne i lymfocytkolonierne var blastlignende og B220+, sIg -, Mac-1 -, Gr-1 -, Ly-1 -, L3T4 -, Ly-2-og CD3-. Tredive til 70% af cellerne var Thy-1+. mu-kæde mRNA blev påvist i de fleste celler ved in situ hybridisering med en antisense RNA-probe. Når lymfocytkolonier afledt af en enkelt celle blev samlet og injiceret individuelt i scid-mus, var donor-Type IgM målbar i serum fra mus, og Milter indeholdt donor-type B-celler. Vi gennemførte derefter indledende screening af vækstfaktorer for at identificere vækstfaktorer, der kan erstatte pokeev mitogen-stimuleret miltcellekonditioneret medium i den primære kultur. Kombinationer af to faktorer, der omfattede SF plus IL-6, IL-11 eller granulocytkolonistimulerende faktor, var alle effektive i den primære kultur til opretholdelse af B-lymfoidpotentialet. Interessant nok kunne IL-3 hverken erstatte eller handle synergistisk med SF for at understøtte lymfoidpotentialet i de primære kulturer. Vores observationer viser, at mange primitive forfædre, der tidligere blev antaget at være myeloid-engagerede, også har B-lymfoid potentiale. Dette kultursystem bør vise sig værdifuldt for belysning af mekanismerne, der regulerer tidlige stadier af lymfohemopoiesis.