Absorptiometri
i den oftest anvendte spektrale metode absorberes den elektromagnetiske stråling, der leveres af instrumentet, af analytten, og mængden af absorptionen måles. Absorption opstår, når et kvantum af elektromagnetisk stråling, kendt som en foton, rammer et molekyle og hæver det til en ophidset (højenergi) tilstand. Intensiteten (dvs., energien, i form af elektromagnetisk stråling, overført over et enhedsareal pr.tidsenhed) af den indfaldende stråling falder, når den passerer gennem prøven. De teknikker, der måler absorption for at udføre et assay, er absorptiometri eller absorptionsspektrofotometri.
normalt er absorptiometri opdelt i kategorier afhængigt af energi-eller bølgelængdeområdet for den indfaldende stråling. I rækkefølge af stadig mere energisk stråling er typerne af absorptiometri radiobølgeabsorptiometri (kaldet kernemagnetisk resonansspektrometri), mikrobølgeabsorptiometri (inklusive elektronspinresonansspektrometri), termisk absorptiometri (termisk analyse), infrarød absorptiometri, ultraviolet-synlig absorptiometriog røntgenabsorptiometri. Instrumenterne, der leverer og måler strålingen, varierer fra et spektralområde til et andet, men deres driftsprincipper er de samme. Hvert instrument består af mindst tre væsentlige komponenter: (1) en kilde til elektromagnetisk stråling i det rette energiområde, (2) en celle, der er gennemsigtig for strålingen, og som kan indeholde prøven, og (3) en detektor, der nøjagtigt kan måle intensiteten af strålingen, efter at den er passeret gennem cellen, og prøven.
i det væsentlige øges mængden af absorberet stråling med koncentrationen af analytten og med afstanden gennem analytten, som strålingen skal bevæge sig (cellebanens længde). Når stråling absorberes i prøven, falder intensiteten af den strålingsstråle. Ved at måle den nedsatte intensitet gennem en celle med fast sti-længde, der indeholder prøven, er det muligt at bestemme koncentrationen af prøven. Da forskellige stoffer absorberer ved forskellige bølgelængder (eller energier), skal instrumenterne være i stand til at kontrollere bølgelængden af den indfaldende elektromagnetiske stråling. I de fleste instrumenter opnås dette med en monokromator. I andre instrumenter gøres det ved brug af strålingsfiltre eller ved brug af kilder, der udsender stråling inden for et smalt bølgelængdebånd.
fordi bølgelængden, hvor stoffer absorberer stråling, afhænger af deres kemiske sammensætning, kan absorptiometri også bruges til kvalitativ analyse. Analytten placeres i cellen, og bølgelængden af den indfaldende stråling scannes gennem et spektralt område, mens absorptionen måles. Det resulterende plot af strålingsintensitet eller absorption som en funktion af bølgelængde eller energi af den indfaldende stråling er et spektrum. De bølgelængder, hvor toppe observeres, bruges til at identificere komponenter i analytten.