Cholinacetyltransferase (ChAT) – En nyttig immunhistokemisk markør til morfologiske undersøgelser af neuroner

Cholinacetyltransferase (ChAT) er det, der er ansvarlig for biosyntese af neurotransmitteren acetylcholin. Størstedelen af acetylcholin syntetiseres lokalt ved nerveterminaler, hvor ChAT katalyserer overførslen af en acetylgruppe fra acetyl-coensym A til cholin, en proces, der finder sted i et enkelt trin. ChAT udtrykkes af kolinerge neuroner i centralnervesystemet (CNS) og perifere nervesystemer (PNS) (4), som er fordelt i mange forskellige regioner i hjernen, rygmarven og nethinden og deltager i læring, hukommelse, bevægelse og syn (2,4).

Chatekspression i rotte rygmarvsneuroner, IHC immunhistokemi fritflydende: Cholinacetyltransferase / ChAT antistof – IHC på rotte rygmarv ved hjælp af Kaninantistof mod rotte, musechat (cholin O-acetyltransferase): hele serum ved 1:2000 fortynding. Forabsorption af antistoffet med det immuniserende peptid afskaffer fuldstændigt immunfarvningen (ikke vist).

Lær mere om neuronale markører

ChAT-antistoffarvning anvendes ofte i morfologiske undersøgelser af kolinerge cellepopulationer. I pattedyrets nethinde udtrykkes for eksempel ChAT af undergrupper af både amacrine og ganglionceller (2). Disse ChAT-positive neuronale populationer kan identificeres ved hjælp af anti-ChAT-antistoffer i sammenhæng med immunhistokemiske (IHC) assays. Når det udføres i nethinden, producerer ChAT IHC et karakteristisk dobbeltbåndsfarvningsmønster i det indre pleksiforme lag, hvor kolinerge amacrine-og ganglioncelledendritter danner to forskellige synaptiske lag (2). Et af Novus ChAT-antistofferne er blevet anvendt til at kvantificere cholinerge celleoverlevelse i pattedyrs nethinde efter proteinkinasehæmning i musesygdomsmodeller (1). Novus ChAT-antistoffer er også blevet anvendt i en række cellekultursystemer til vurdering af differentiering og overlevelsesrate for kolinerge neuroner efter forskellige manipulationer. For eksempel er Novus-antistoffet (NBP1-30052) blevet brugt til at identificere differentierede kolinerge neuroner i cellestudier med det formål at definere et kulturbaseret eksperimentelt system, der ikke er afhængig af primære neuroner (3). Mens et andet Novus-Anti-ChAT-antistof (NB110-89724) blev brugt til kvalitativt at vurdere overlevelse af kolinerge neuroner i rygmarvseksplanter (5).

Novus Biologicals tilbyder Chatreagenser til dine forskningsbehov inklusive:

  • chatantistoffer
  • Chatlysater
  • Chatproteiner
  • ChAT RNAi

PMID:

  1. 21498608
  2. 9786999
  3. 23095258
  4. 10594838
  5. 23674184

  • Burugula, B., Ganesh, B. S. og Chintala, S. K. (2011). Curcumin dæmper staurosporin-medieret død af retinale ganglionceller. Invester Ophthalmol Vis Sci 52, 4263-4273.
  • Jeon, C. J., Strettoi, E. og Masland, R. H. (1998). De største cellepopulationer af musens nethinde. J Neuroci 18, 8936-8946.
  • Liu, J., Tu, H., Jang, D., Jeng, H. og Li, Y. L. (2012). Spænding-gated natrium kanal ekspression og aktion potentiale generation i differentierede NG108-15 celler. BMC Neurosci 13, 129.
  • Oda, Y. (1999). Cholinacetyltransferase: struktur, fordeling og patologiske ændringer i centralnervesystemet. Pathol Int 49, 921-937.
  • Schisas, N., Rojas, R., Kootala, S., Andersson, B., Pettersson, J., Hilborn, J. og Hailer, N. P. (2014). Hyaluronsyrebaseret hydrogel forbedrer neuronal overlevelse i rygmarvsskivekulturer fra postnatale mus. J Biomater Appl 28, 825-836.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.