tento návrh addrsses vztah struktury a funkce proteinů koagulace krve závislých na vitaminu k, se zvláštním důrazem na kyselinu gama karboxyglutamovou. Tento program, který zahrnuje čtyři samostatné, ale související projekty, se vyvinul z předchozí práce vyvinuté v předchozím období. V projektu #1 bude studován vztah struktury a funkce faktoru IX a protrombinu. Mutantní formy těchto proteinů, získané od pacientů s dědičnými strukturálními a funkčními abnormalitami těchto proteinů, budou purifikovány pomocí konformačních specifických protilátek, fragmentovaných proteolýzou a mutantní peptidy sekvenovány. Molekulární defekt v každém mutantním proteinu bude stanoven a korelován s funkčními defekty. V projektu #2 bude nově objevený membránový protein destiček KC4 plně charakterizován a lokalizován na specifické subcelulární organely. Bude stanovena funkce a vazebné vlastnosti tohoto proteinu, exprimované pouze na aktivovaných krevních destičkách. Projekt č. 3 bude definovat roli Gla v protrombinu. Bude hodnocen nový model interakce Gla, kovu a membrány v protrombinu pomocí imunochemických a spektroskopických přístupů. Membránové vazebné vlastnosti a distribuce Gla řady částečně karboxylovaných protrombinů by měly poskytnout vhled do tohoto problému. Projekt č. 4 je přímou klinickou aplikací našich imunochemických studií. Pomocí protilátek specifických pro plně karboxylovaný protrombin (NPT) a des-gama-karboxyprotrombin (APT)budeme pokračovat v klinickém hodnocení vyhodnotit tyto testy jako zlepšenou metodu sledování perorální antikoagulační terapie. Nedostatek vitaminu K u novorozenců a jejich matek bude studován s nadějí na vývoj jednoduchých racionálních přístupů k eliminaci hemoragického onemocnění novorozence. Dále bude zkoumán test antigenu KC4, specifického pro aktivované krevní destičky jako metoda detekce pretrombotického stavu. Tyto základní a klinické projekty by měly přispět k pochopení této skupiny proteinů, poskytnout nové způsoby diagnostiky pretrombotického stavu a dificience vitaminu K a vyvinout další údaje, které ospravedlní použití testu NPT v protrombinovém čase významně snížit morbiditu / mortalitu spojenou s perorální antikoagulační terapií.