onkologické dopisy

Úvod

rakovina plic je nejčastější rakovinou po rakovině prsu a tlustého střeva, celosvětově (1). Výskyt rakoviny plic je podobný úmrtnosti na totonemoci v důsledku vysoké úmrtnosti rakoviny plic. Podleúdaje dostupné od Mezinárodní agentury pro výzkum onCancer, očekává se, že roční úmrtí na rakovinu plic vzroste do roku 2030přibližně 10 milionů (2).Nejběžnějším typem rakoviny plic histologicky jeadenokarcinom, který představuje téměř 50% všech rakovin plic (3).

histologicky existují dva hlavní typy plicního karcinomu, malobuněčný karcinom plic (SCLC) a non-SCLC (NSCLC). Sclcúčty pro aproximatley 20% všech případů rakoviny plic, whileensclc představuje téměř 80% případů rakoviny plic (4). Existují tři histologické podtypynsclc: i) spinocelulární karcinom (SCC), ii) adenokarcinom, AII) velkobuněčný karcinom plic, z nichž každý představuje 25, 40 a 15% z celkového počtu případů NSCLC (5).

navzdory uznání rakoviny plic jako jednoho z nejagresivnějších typů rakoviny dochází k pomalému pokrokuklinické výsledky, přestože je k dispozici velké množství nových léků. Nejdůležitější otázky pro tuto nevýhodu vklinické zacházení s rakovinou plic je nedostupnost ověřenýchmarkerů nádoru séra, které jsou užitečné jak při diagnostice, tak při diagnostice onemocnění (6). Mnohotypy malignity způsobují pleurální výpotky a rakoviny, které nejvícečasto metastazují do pleury, jsou karcinomy plic a prsua lymfomy. I když je cytologické vyšetření pleurálníefúze považováno za standardní přístup pro diagnostiku, jeho citlivost je obvykle pouze 50-70% (7,8).

řada nádorových markerů, včetněkarcinoembryonální antigen (CEA), sacharidový antigen 125 (CA125) a CYFRA21-1,fragment cytokeratinu 19 (CK19), bylvyhodnoceny jako lepší a přesnější nádorové markery v séru i pleurální tekutině v mnoha studiích (7,8). Bylo také pozorováno, že kombinace dvou nebo více markerů je silnější než jeden marker. Skutečná diagnostická schopnost těchto markerů však nebyla v mnoha těchto studiích hodnocena, protože cytologická přítomnost nádorových buněk byla zjištěna v pleurálních výpotcích pacientů (9-11). Bylo zjištěno, že mnoho z výše uvedených markerů bylo zvýšeno v pleurálních účincích pacientů s nádorovým onemocněním ve srovnání s benigními pleurálními účinky (7). Bylo zjištěno, že buňky lidského karcinomu plic odvozené od pleuralefúze jsou více invazivní a metastatické než nádorové buňky z primárních lézí a tento rozdíl může souviset s epiteliálně-mezenchymálním přechodem (EMT).

EMT, která obvykle hraje důležitou roliembryonální tkáňová morfogeneze a fibróza po poranění(12,13), je nevhodně reaktivována běhemdospělost za určitých patologických stavů, jako je rakovina, apřispívá k nádorovým metastázám (13). Je známo, že EMT zprostředkovává mnoho změn a výslednou modulaci fenotypu v tumorarchitektuře. EMT je charakterizována narušenímintercelulární adheze, zvýšená motilita nádorových buněk, snížená vnímavost k anoikis a apoptóze a při uvolňování buněkz epiteliální tkáně (9-11). Uvolněné nádorové buňky, které jsouodolné vůči anoikis, předpokládají mezenchymální fenotyp, který je vhodný pro migraci, invazi a šíření, vše přispívá k metastatické progresi. V mnoha případech stupeň EMT rakovinných buněk určuje závažnost rakoviny (14). Bylo také prokázáno, že EMT se podílí na rezistenci na anoikis, což je rozhodující v inhibici rakovinných metastáz v různých solidních nádorech (15).

Cytokeratiny (CKs) jsou běžné nádorové markery a jsouhlavní strukturní prvky cytoskeletu v epitelubuněk a na základě strukturálních vlastností CKs existuje 20 subtypů. Z nich je CK19 rozpustný a kyselý CK typu I a je exprimován v epitelové výstelce bronchiálního stromu a je známo, že je nadměrně exprimován v tkáních rakoviny plic (16). Existuje zvýšená degradace CK19NEOPLASTICKY transformované epiteliální buňky v důsledku zvýšené aktivity kaspázy-3 a proteolytické fragmenty, zejména CYFRA21-1,se uvolňují do krve. CK19 je považována za úzce spojenou s rakovinou plic; některé studie však uváděly, že exprese ck19 je u některých karcinomů plic negativní (9-11). Ck19exprese v některých buněčných liniích karcinomu plic byla snížena následujícítransformující růstový faktor (TGF)-β-indukovaný EMT (17). Cirkulující hladiny fragmentů CK19VČETNĚ CYFRA21-1 pravděpodobně odrážejí rozsah cytoskeletální formace v rakovinných buňkách a mohou se také spojovat se stupněm diferenciace nádorů vůči dlaždicovému epitelu (16).

v této studii byly použity vzorky nádorů od 111 pacientů s plicní rakovinou a byl zkoumán výskyt negativních expresorů CK19 u různých typů rakoviny plic, stejně jako to, zda indukce EMT v primárních fokusních buňkách ovlivňuje expresi CK19. Zkoumali jsme také, zdaherck19-negativní rakoviny plic byly invazivnější a metastatické.

pacienti a metody

obecně

všech 111 pacientů bylo vybráno podle 7. verze TNM stagingu, popsané americkým smíšeným výborem onCancer a Unií pro mezinárodní kontrolu rakoviny v roce 2007 (9-11). Do této studie byli zařazeni pacienti s rakovinou plic s diagnózou různých typů rakoviny plic ve stadiu IV a léčeni inhibitory tyrosinkinázy nebo platinou(75 mg/m2) a docetaxelem (75 mg/m2) na bázi chemoterapie. Pacienti byli přijati do lidové Nemocnice Subei mezi lednem 2013 a prosincem 2014.

studie byla schválena etickou komisí lidové Nemocnice Subei. Byl získán písemný informovaný souhlasod každého účastníka. Tato studie je v souladu s „etickým kodexem Světové lékařské asociace“ (Helsinská Deklarace, 1964).111 pacientů tvořilo 90 mužů (44-82 let) a 21 žen (40-75 let). Charakteristiky pacientů jsou uvedeny v tabulce I.bylo identifikováno celkem 56 případů adenokarcinomu, 21SCC, 32 SCLC a 2 případy adenosquamózního karcinomu.Zařazení pacienti odpovídali následujícím kritériím: Karnofskyscore s >60letou délkou života >3 měsíce, bez onemocnění imunitního systému, normálního elektrokardiogramu, normální funkce jater a ledvin a bez protinádorové léčby do jednoho měsíce před zahájením studie. Případy léčené inhibitory tyrosinkinázy byly typu adenokarcinomu.

vzorky krve byly odebrány od všech pacientůa séra byla oddělena a zmrazena až do následné analýzy.Vzorky pleurálního výpotku byly odebrány podle schválených postupů a byly vyšetřeny cytologicky a zpracovány naimunohistochemii.

imunohistochemie

vzorky nádorové tkáně (primární ložiska) byly zpracoványpro imunohistochemii pro detekci CK19, E-kadherinu avimentinu. Vzorky tkáně primárního zaměření byly fixovány ve formalinu azamontovány do parafinových bloků. Více úseků (4 µm) od každéhovzorek byl použit pro imunohistochemickou analýzu. Vzorky byly opatřeny hematoxylinem a eosinem. Anti-CK19, anti-e-cadherin aanti – vimentinové protilátky byly zakoupeny od společnosti TIYO BiotechnologyCorporation (Šanghaj, Čína). Anti-ck19 králičí polyklonální protilátka (katalog.číslo Z98123) byl použit v ředění 1: 50; Anti-e-cadherin ck19 rabbit polyklonal (katalogové číslo. Z86603) protilátka byla použita v ředění 1: 100; a anti-vimentin CK19rabbit polyklonální protilátka (katalogové číslo. Z40651) byl použit při adiluci 1: 500, následované inkubací s anti-IgG konjugovaným křenemperoxidázou (Beijing CellChip Biotechnology Co.,Ltd., Peking, Čína) v poměru 1: 100. Vývoj barev byl proveden za použití 3,3 ‚ – diaminobenzidinového substrátu.

vzhled tan částic v buněčné membráně acytoplazma byla považována za pozitivní pro CKl9, E-cadherin avimentin. Imunohistochemické výsledky byly potvrzenydva patologové používající dvojitě zaslepenou metodu.

markerové analýzy

automatický chemiluminescenceimmunoanalyzační analyzátor Roche E601 Cobas (Roche Diagnostics, Basel, Švýcarsko) byl použit k měření sérových CEA, CA125, neuron-specifická enoláza (NSE), α-fetoprotein (AFP) a CYFRA21-1 v sérech pacientů a pleuraleffuzích. CYFRA21-1 >3,3 ng / ml, NSE >15,2 ng / ml, CEA >5,0 ng/ ml, CA125 >35,0 ng / ml a AFP >7 ng / ml byly zvažoványpozitivní hodnoty.

EMT indukovaná TGF-β1 v plicních nádorových buňkách

nádorové buňky byly izolovány z tkání primárního zaměření získaných od pacientů. Primární buňky byly izolovány zprimární nádorová tkáň a pleurální výpotek od stejného pacienta abyly kultivovány. Buňky byly izolovány ve dvou krocích: i) centrifugace separačním médiem lymfocytů (specificgravitation of 1.077), následované kultivací v médiu RPMI-1640 obsahujícím 20% fetálního hovězího séra (Beijing LabLead BiotechnologyCorporation, Peking, Čína) po dobu 2 dnů. ii) následně 40/20%Percoll (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Peking, Čína) byl použit jako centrifugace druhého stupně pro separaci buněk. Shromážděné buňky byly znovu kultivovány v kultivačním médiu rpmi-1640 obsahujícím 20% fetálního hovězího séra a inkubovány při 37°C při 5% CO2 atmosféře až do 70-80% konfluence. Buňky byly ošetřeny TGF-β1 (zakoupeny odshanghai Kexing Biotech Co., Ltd., Šanghaj, Čína) při 5 ng / ml pro24 h. buňky byly poté promyty a zpracovány. Imunohistochemickýanalýza E-kadherinu, CK19 a vimentinu byla provedena předa po léčbě TGF-β1, jak je popsáno výše. Přítomnost nebopřítomnost těchto markerů byla hodnocena jako pozitivní nebo negativní.

Statistická analýza

P<0,05 byla považována za statisticky významnou.

výsledky

charakteristiky pacientů

111 pacientů tvořilo 90 mužů a 21 žen s podobným věkovým rozložením (40-80 let). Pacienti byli diagnostikováni s rakovinou plic ve stadiu IV. Histologicky byla většinapřípadů adenokarcinomový Typ, následovaný SCLC a SCC, a to jak u mužů, tak u žen (TableI). Byly pouze dva případy adenosquamózního karcinomutento vzorek pacienta. Většina pacientů dostalachemoterapie založená na chemoterapii na bázi platiny a docetaxelu, zatímco u pacientů s epidermálním růstovým faktorem byla podávána terapie inhibitorem tyrosinkinázy (TKI) (Gefitinib). Pouze malý počet pacientů (5 mužů a 1 Žena)nedostal tyto terapie kvůli finančním omezením.

histologie primárního nádorutkáně

nádorové tkáně od 111 pacientů byly vyšetřenyimunohistochemicky pro expresi CK19. Zatímco u některých karcinomů plic byla pozorována zvýšená exprese Ck19, ztráta CK19 je pravděpodobně spojena s EMT (17). V současné studii exprese CK19 chyběla u mnoha nádorů SCLC,>50% u mužů a 100% u žen. Jako taková byla exprese CK19RELATIVNĚ snížena u nádorů SCLC ve srovnání s jinými plicními karcinomy (obr. 1). Zadenokarcinomy, přibližně 31% nádorů u mužských pacientůbyly negativní na CK19, což bylo mnohem nižší u žen (7%).Celkově sklc nádorové tkáně vykazovaly větší pravděpodobnost Emtcharakteristiky (tabulka I). Bylo zjevné snížení podílu expresněprimárních nádorů negativních ck19 a buněk pleurálního výpotku po Tkitherapii ve srovnání s neléčenými nebo chemoterapeutickými léčenými pacientynádory u všech typů rakoviny plic (obr. 2).

hladiny CYFRA21-1

hladiny Cyfra21-1 v séru a pleurálním výpotku jsoupovažovány za důležité markery malignity pro mnoho typůrakoviny, zejména pro rakovinu plic. Vzhledem k tomu, že CYFRA21-1 je afragmentem CK19, zkoumali jsme hladiny sérového a pleurálního výpotkucyfra21-1 jako funkci ztráty exprese CK19 v buňkách pleurálního výpotku. Výsledky ukázaly, že když byl CK19 silně exprimován v buňkách primárního zaměření a pleurálního výpotku, hladiny CYFRA21-1 byly vysoké a když byla exprese CK19 ztracena vprimárních nádorech a / nebo buňkách pleurálního výpotku, hladiny CYFRA21-1významně se snížily u všech typů rakoviny (obr. 3). Kromě toho byly hladiny CYFRA21-1mnohem vyšší v séru a pleurálním výpotku pacientů skc19-pozitivní SCC nádory ve srovnání s jinými typy nádorů (obr. 2). Vysoké hladinycyfra21-1 v sérech pacientů s SCC a pleurálním výpotku pravděpodobně odrážísilná přítomnost CK19 u pozitivních nádorů (obr. 1). Výsledky také naznačovaly, žehladiny Serum CYFRA21-1 byly zvýšeny pouze okrajově u plicních karcinomů ve srovnání s benigními hladinami báze (1,3–2,6 ng/ml) s výjimkou SCC, kde byl nárůst mnohem vyšší než normálnírozsah (obr. 3). Nicméně, CYFRA21-1úrovně byly výrazně zvýšeny nad benigní rozmezí (6,5-35 ng / ml) (18) v pleurálním výpotku pacientů s plicní rakovinou, což naznačuje, že měření pleurálního výpotku CYFRA21-1 je optimálním nádorovým markerem.

další sérové markery

markery nádorové malignity včetně CA125, CEA, NSE a AFP byly měřeny v sérech několika pacientů a mezi pacienty a hladinami byly značné rozdíly.U pacientů s ADC byl tedy průměr CA125, CEA, NSE a AFPwas 23.6±10.9, 48.3±39.7, 10.1±2.4, a 2,1±0,6. U pacientů s SCC byl průměr CA125, CEA, NSE a AFP 57.1±31.5, 5.6±2.7, 20.8±2.5, a 2,6±0,4, respektive žádný z nichmarkerů se významně nelišil od normálního rozmezí (obr. 4).

indukce EMT v primárních ohniskových buňkách pomocí TGF-β1

TGF-β1 při inkubaci s plicními nádorovými buňkami s primárním zaměřením vyvolala v mnoha případech změny relevantní pro EMT. Tak, vtéměř 40% adenokarcinomových nádorů, CK19-pozitivní primární fokuscelly byly indukovány ke ztrátě exprese CK19 a podstoupily EMT byTGF-β1. Tento podíl nádorů byl 28% pro SCC a 50% pro SCLC (obr. 5). Primární ohniskové buňky SCLC jsou tedy indukovatelné, aby snadněji podstoupily EMT TGF-β1. Jak bylo uvedeno výše, SCLC primární buňky vykazují vyšší úroveň EMT I bez indukce TGF-β1 (TableI).

další sadou důležitých markerů EMT je ztráta ofE-kadherinu a zisk exprese vimentinu. Bylo zjištěno, že E-cadherinbýt negativní u téměř 37,5% primárních nádorových buněk adenokarcinomu, 52,3% nádorových buněk SCC a 22% nádorových buněk SCLC (obr. 6), před léčbou TGF-β1. Bycontrast, exprese vimentinu v těchto nádorech byla pozitivní u 23,2% nádorových buněk adenokarcinomu, 33,3% nádorových buněk SCC a 31,3%nádorových buněk SCLC (obr. 7). Následujícíléčba primárních fokusních buněk plicního nádoru pomocí TGF-β1 byla ztráta exprese E-kadherinu vždy spojena se zvýšením exprese invimentinu (obr. 8). Aprocento SCC nádorů, které vykazovaly tuto odpověď na TGF-β1 (40% změna exprese E-kadherinu a 57% exprese vimentinu) bylvyšší než u adenokarcinomu a SCLC (obr. 6).

diskuse

srovnávací stav exprese CK19 v primárních tkáních rakoviny plic a v pleurálních výpotcích může být užitečný při hodnocení metastázující schopnosti těchto rakovinných buněk. Proto buňky pleurálního výpotku pacienta ifa mají vyšší úroveň negativníexprese CK19 ve srovnání s primárními tkáněmi rakoviny plic stejného pacientapouze se předpokládá, že negativní exprese Ck19 je spojena s invazí a metastázami (19). Tak, v této studii, velkýproporce pacientů s nádory SCLC měl nádorové tkáně bez výrazu CK19 a pleurální výpotek buněk u těchto pacientůukázala nedostatek exprese CK19, což naznačuje vysoký stupeňmetastázy u tohoto typu rakoviny plic, což je typickécharakteristické pro SCLC (20). Bylo navrženo několik důvodů pro ztrátu exprese CK19, včetně změněné exprese a zvýšené proteolytické degradace (21).

protože CYFRA21-1 je fragment CK19, sérum apleurální výpotek hladiny CYFRA21-1 jsou považovány za důležité markery malignity u mnoha typů rakoviny, zejména u plicrakoviny (7,21). Je však obtížné si být jistýpokud jde o diagnostiku rakoviny založenou na cirkulujících hladinách CYFRA21-1 jakoexistují případy rakoviny plic, kdy dochází ke snížení hladiny CYFRA21-1, zatímco v jiných případech dochází k nárůstu (7,21).Ze současných zjištění však hladiny CYFRA21-1 v séru klesaly se zvýšenou možností EMT, jak bylo zjištěnoztráta exprese CK19 v pleurálních výpotcích ve srovnání s odpovídající primární nádorovou tkání. Sérová hladina CYFRA21-1spolu se stavem exprese ck19 rakovinných buněk z primárního zaostření a pleurálních výpotků může pozitivně identifikovat invazia metastázové schopnosti buněk rakoviny plic. Ostatní markery, včetně CA125, CEA, AFP a NSE, které se běžně používají pro diagnostiku rakoviny, nebyly v tomto hodnocení konzistentní.

metastazující schopnost je propůjčena primárním rakovinným buňkám prostřednictvím EMT a jedním z primárních faktorů, které mohou indukovat EMT, je TGF-β1. Ačkoli TGF-β1 normálně funguje jako aninhibitor proliferace epiteliálních buněk, kvůli změněnýmsignalizačních drah v mnoha rakovinných buňkách působí TGF-β1 ke zvýšeníproliferace rakovinných buněk, včetně buněk rakoviny plic (22). Kromě zlepšenírůst rakovinných buněk je známo, že TGF-β1 podporuje EMT v rakovinných buňkách a přispívá tak k invazi rakovinných buněk a metastázám. To hasbeen navrhl, že v časných stádiích primárního nádoruvývoj v epiteliálních tkáních, TGF-β1 působí jako inhibitor růstu nádoru prostřednictvím zastavení buněčného cyklu a apoptózy(23,24).Nicméně, jak dochází k progresi nádoru, v pozdějších stádiíchvývoj nádoru, dochází buď k inaktivaci dráhy TGF-ß1signalizace nebo aberantní regulaci buněčného cyklu arakovinné buňky se stávají rezistentními na inhibici růstu TGF-β1 (23,24). Za těchto podmínek se používá TGF-β1jako růstový promotor rakovinnými buňkami (25). Exprese mRNA a proteinu ofTGF-β1 byla značně zvýšena u mnoha typů rakoviny, včetně pankreatu, tlustého střeva, žaludku, plic, endometria,prostaty, prsu, mozku a kostí (26).

vzhledem k tomu, že sklon podstoupit EMT je zvýšen v přítomnosti cytokinu, jako je TGF-β1, který je znám jako zvýšený u pacientů s rakovinou plic, zkoumali jsme Eminducibilitu primárních fokusních buněk, ex vivo, pomocí TGF-β1.V závislosti na použitém markeru EMT měly nádory SCLC a SCC vyšší schopnost podstoupit EMT indukovanou TGF-β1. SCLC primární focuscells jsou indukovatelné pro EMT pomocí TGF-β1 snadněji, pokud vezmeme v úvahu ztrátu exprese CK19. Ve skutečnosti existuje vyšší stupeňemt, pokud jde o nedostatek CK19 v primárních nádorových buňkách SCLC. Bycontrast, SCC nádorové primární buňky reagují ztrátou E-cadherina zvýšené exprese vimentinu. Downregulace E-kadherinu spolu s upregulací N-kadherinu charakterizuje Emtproces a tyto změny v expresi těchto proteinů jsouspojené se získáním rezistence na apoptózu aanoikis (27,28).

Stručně řečeno, výsledky této studie naznačujíže invaze a metastázy plicních nádorových buněk mohou být posouzeny tím, že mají úplný obraz sérového CYFRA21-1 společně se stavem exprese ck19 buněk primárního fokusu a pleurální efuze. Toto hodnocení může být dále zlepšeno zkoumáním náchylnosti izolovaných primárních fokusních buněk k EMT indukované PODGOTGF-β1 v buněčné kultuře.

poděkování

autoři by chtěli uznat technickou pomoc Dr. Yong Chen a Dr. Jixin Jiang.

	Jemal A, Bray F, centrum MM, Ferlay J, WardE a Forman D: Globální statistika rakoviny. CA rakovina J Clin.61:69–90. 2011. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Haghgoo SM, Allameh A, Mortaz E, GarssenJ, Folkerts G, Barnes PJ a Adcock IM: Farmakogenomika a cílená léčba rakoviny: se zaměřením na nemalobuněčný karcinom plic.Eur J Pharmacol. 754:82–91. 2015. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Morales-Oyarvide V a Mino-Kenudson M:Vysoce kvalitní plicní adenokarcinomy s mikropapilárními a / nebo pevnými látkamivzory: přehled. Curr Opin Pulm Med. 20:317–323. 2014.Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Burdett S, Stewart LA a Rydzewska L: Asystematický přehled a metaanalýza literatury: chemoterapie a chirurgie versus samotná operace u nemalobuněčného karcinomu plic. JThorac Oncol. 1:611–621. 2006. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Travis WD: patologie rakoviny plic. ClinChest Med. 2365–81. (viii) 2002. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bastawisy AE, Azzouny ME, Mohammed G, Alláh AA a Behiry E: fragment sérového cytokeratinu 19 v pokročilémrakovina plic: Mohli bychom nakonec mít sérový nádorový marker?Ecancermedicalscience. 8:3942014.PubMed / NCBI
	Hsieh TC, Huang WW, Lai CL, Tsao SM a SuCC: diagnostická hodnota nádorových markerů v cytologicky negativních pleurálních výpotcích spojených s lungadenokarcinomem.Rakovina Cytopatol. 121:483–488. 2013. Zobrazit Článek: Google Scholar : PubMed / NCBI
	liang QL, Shi HZ, Qin XJ, Liang XD, JiangJ a Yang HB: diagnostická přesnost nádorových markerů pro malignípleurální výpotek: metaanalýza. Hrudník. 63:35–41. 2008.Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Miedouge M, Rouzaud P, Salama G, et al: hodnocení sedmi nádorových markerů v pleurální tekutině pro diagnostiku maligních výpotků. Br J Rakovina. 81:1059–1065. 1999.Zobrazit Článek: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Huang WW, Tsao SM, Lai CL, Su CC a TsengCE: diagnostická hodnota hladin Her-2 / neu, Cyfra 21-1 a karcinoembryonikantigenu u maligních pleurálních výpotků lungadenokarcinomu. Patologie. 42:224–228. 2010. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Riantawan P, Sangsayan P, BangpattanasiriK a Rojanaraweewong P: omezená aditivní hodnota hladiny pleurálního fluidkarcinoembryonálního antigenu v maligním pleurálním výpotku.Dýchání. 67:24–29. 2000. Zobrazit Článek: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Hay ED: mezenchymální buňka, její role vbryo a pozoruhodné signalizační mechanismy, které ji vytvářejí.Dev Dyn. 233:706–720. 2005. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino M, Micheli P, Pallotti F agiordano F: patologický význam plasticity epitelu a mezenchymalfenotypu. Pathol Res Pract. 195:379–389. 1999.Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Guarino M, Rubino B a Ballabio G: Therole epiteliálně-mezenchymálního přechodu v patologii rakoviny.Patologie. 39:305–318. 2007. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Chunhacha P, Sriuranpong V achanvorachote P: epiteliálně-mezenchymální přechod mediatesanoikis rezistence a zvyšuje invazi do pleuraleffusion odvozených lidských buněk rakoviny plic. Oncol Lett. 5:1043–1047.2013.PubMed / NCBI
	Kosacka M a Jankowska R: Srovnání exprese cytokeratinu 19 v nádorové tkáni a sérových CYFRA 21-1úrovně u nemalobuněčného karcinomu plic. Pol Arch Med Wewn. 119:33–37.2009.PubMed / NCBI
	Xu GP, Li QQ, Cao XX, Chen Q, Zhao ZH, Diao ZQ a Xu ZD: účinek přenosu genu TGF-β1 a Smad7 na fenotypové změny alveolárních epiteliálních buněk potkanů. Buňka MolBiol Lett. 12:457–472. 2007. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Romero S, Fernández C, Arriero JM, EspasaA, Candela A, Martín C a Sánchez-Payá J: CEA, CA 15-3 a CYFRA21-1 v séru a pleurální tekutině pacientů s pleurálními výpotky.Eur Respir J.9:17-23. 1996. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Fujisue M, Nishimura R, Okumura Y, TashimaR, Nishiyama Y, Osako T, Toyozumi Y a Arima N: Klinickývýznam negativního karcinomu prsu ck19. Rak (Basilej).5:1–11. 2012. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Pietanza MC, Byers LA, Minna JD a RudinCM: malobuněčný karcinom plic: Povede nedávný pokrok ke zlepšení? Clinton Res. 21: 2244-2255. 2015. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Ono A, Takahashi T, Mori K, Akamatsu H, Shukuya T, Taira T, Kenmotsu H, Naito T, Murakami H, Nakajima T, etal: prognostický dopad sérového CYFRA 21-1 u pacientů s pokročilýmplicní adenokarcinom: retrospektivní studie. BMC rakovina. 13:3542013.Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Bachman ke a Park BH: Duel nature oftgf-beta signalizace: tumor supresor vs. promotor nádoru. Curr OpinOncol. 17:49–54. 2005. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Wakefield LM and Roberts AB: TGF-ßsignaling: pozitivní a negativní účinky na tumorigenezi. CurrOpin Genet Dev. 12:22–29. 2002. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Akhurst RJ a Derynck R: TGF-β signalizacev rakovině-dvojsečný meč. Trendy Buňka Biol. 11: S44-S51.2001. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Jakowlew SB: Transformace růstufaktor-beta v rakovině a metastázách. Metastázy Rakoviny Rev. 25: 435-457. 2006. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI
	Gold LI: role pro transformaci růstufaktor-beta (TGF-beta) u rakoviny člověka. Crit Rev Oncog. 10:303–360.1999.PubMed / NCBI
	Guadamillas MC, Cerezo A a Del Pozo MA: překonání anoikis-cesty k anchorage-nezávislý růstový rakovinář. J Cell Sci. 124:3189–3197. 2011. Zobrazit Článek: Google Scholar : PubMed / NCBI
	Ko H, Kim s, Jin CH, Lee E, Ham S, Yook JIand Kim K: protein kináza kasein kináza 2-zprostředkovaná upregulace ofN-kadherin propůjčuje anoikis rezistenci na karcinom buněk jícnu. Mol Cancer Res.10:1032-1038. 2012. Zobrazit článek: Google Scholar: PubMed / NCBI