defekt mitochondriálního proteinu Mpv17 je základem průhledného Casper zebrafish

casperův kmen zebrafish je široce používán ve studiích od rakoviny po neurovědy. casper nabízí výhodu relativní průhlednosti v dospělosti, což je zvláště užitečné pro in vivo zobrazování pomocí epifluorescence, konfokální, a mikroskopie světelného listu. casper byl vyvinut selektivním šlechtěním dvou dříve popsaných recesivních pigmentových mutantů: 1) perleť, která ukrývá inaktivující mutaci genu mitfa, čímž ryby postrádají pigmentované melanocyty; a 2) roy orbison, mutant s dosud neidentifikovanou genetickou příčinou, který postrádá reflexní iridofory. Abychom objasnili molekulární povahu mutace roy orbison, aby mohla informovat studie pomocí Caspera, vynaložili jsme úsilí na poziční klonování mutace roy orbison. Zjistili jsme, že roy orbison je způsoben intronickým defektem v genu mpv17, kódujícím vnitřní mitochondriální membránový protein, který byl zapojen do syndromu deplece lidské mitochondriální DNA. Mutace roy orbison je fenotypicky a molekulárně pozoruhodně podobná jiné mutaci iridoforu zebrafish zvané transparentní. Pomocí crispantů a zárodečných mutantů indukovaných Cas9 s narušeným otevřeným čtecím rámcem mpv17 ukazujeme v trans-heterozygotních embryích, že nové alely frameshift mpv17, roy orbison a transparent se vzájemně doplňují. Naše práce poskytuje genetický důkaz, že roy orbison i transparent ovlivňují lokus mpv17 podobnou, ne-li identickou genetickou lézí. Identifikace mutantů mpv17 umožní další práci sondování vztahu mezi mitochondriální funkcí a pigmentací, které dosud byla věnována malá pozornost.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.