Ceriodaphnia dubia byly kultivovány ve čtyřech rekonstituovaných vodních formulacích s koncentracemi tvrdosti a zásaditosti v rozmezí od měkké po středně tvrdou vodu, která je vyžadována metodami zkoušení toxicity (mokré) pro kultivaci zkušebních organismů. Účinky těchto kultivačních formulací samotných a v kombinaci se dvěma hladinami Cl -, SO4 (2-) a HCO3 – na reprodukci C. dubia byly hodnoceny standardním tříplodým testem. Reprodukce byla významně snížena, když zkušební vody měly nižší tvrdost než kultivační vody. Reprodukce se však významně nelišila, když zvířata kultivovaná ve vodách s nízkou tvrdostí byla vystavena středně tvrdým vodám. Tvrdost kultivační vody významně neovlivnila citlivost C. dubia na tři anionty. Naopak zvýšená tvrdost ve zkušebních vodách významně snížila toxicitu Cl – a SO4 (2 -), s toxicitou HCO3 po stejném vzoru. Zásaditost nevykazovala konzistentní účinek na toxicitu Cl – a SO4(2 -). Fyziologický stres při umísťování zvířat pěstovaných ve středně tvrdé vodě do měkčích zkušebních vod může přispět k okrajovým poruchám jinak netoxických odpadních vod. Standardní mokrý protokol by měl být revidován, aby kultura C. dubia za podmínek nižší tvrdosti lépe reprezentovala místní chemii povrchových vod.